革兰阴性菌中碳青霉烯酶基因分布及传播特性研究

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1、万方数据论文题目：堇兰阴性菌虫毯壹重缢酶基固佥壶区佳搔挂：眭婴究答辩委员会主席：答辩委员会成员：万方数据目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯99刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯第—部分革兰阴性菌中不同种属细菌对碳青霉烯类药物耐药特性和碳青霉烯酶耐药基因分布的研究材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18：口木⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯lo分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25第二部分：革兰阴性菌中碳青霉烯酶基因传播特性的研究材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．27结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31：口木⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．j分析与{=寸论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．36全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．38正文参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．39附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．44致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．45综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．46综述参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．57论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯67万方数据温州医科大学硕士学位论文万方数据温州医科大学硕士学位论文革兰阴性菌中碳青霉烯酶基因分布及传播特性研究中文摘要目的研究临床分离的革兰阴性菌中不同种属细菌对碳青霉烯类药物的耐药情况；了解革兰阴性菌中不同种属细菌中碳青霉烯酶耐药基因分布；同时探讨碳青霉烯酶耐药基因在不同菌属

4、中的播散特性，为临床用药及控制医院感染提供依据。方法1、回顾性分析2008"--2012年间温州医科大学附属第一医院临床分离革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药物的耐药情况，了解5年问不同菌属对碳青霉烯类药物的耐药趋势。2、碳青霉烯类药物对碳青霉烯耐药革兰阴性菌的MIC值检测：采用琼脂稀释法检测碳青霉烯类药物亚胺培南、美罗培南和厄他培南对碳青霉烯耐药革兰阴性菌的最低抑菌浓度值(MICs)，结果根据2013年CLSI的标准判读。3、碳青霉烯酶表型检测：采用改良的Hodge实验对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌进行碳青霉烯酶的表型检测。4、碳青霉烯酶基因检测：PCR检测碳青霉烯耐

5、药的肠杆菌科细菌和铜绿假单胞菌中的A类碳青霉烯酶基因、B类金属酶基因和D类blaoxg．48基因，PCR检测碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌中的blaoxg．23．．24．．5l，．58、6肠MP、blavIM，、blaolM、blasxM．1、blasPM、blaNDM．1基因，对PCR阳性产物进行测序确认，分析革兰阴性菌中不同菌属中主要流行的碳青霉烯酶基因。5、碳青霉烯酶基因水平转移研究：采用接合转移试验分析碳青霉烯酶基因阳性细菌中的碳青霉烯耐药基因的水平转移特性。6、耐碳青霉烯革兰阴性菌的流行性研究：脉冲场凝胶电泳分析耐药菌株之间的同源性，研究携带碳青霉烯酶基因的

6、各菌属细菌在院内的流行特性；同时用多位点测序分型方法(MLST)检测碳青霉烯酶基因阳性的肺炎克雷伯菌的ST型，明确流行的主要ST型，并与国际流行型进行比较。睦蟹二日术1、2008---2012年从临床标本中分离的3139株革兰阴性菌中，对碳青霉烯酶耐药的菌株共754株(24．0％)，鲍曼不动杆菌对碳青霉烯的耐药率最高，达82．3％，万方数据温州医科大学硕士学位论文其次是铜绿假单胞菌(36．6％)，不同菌属肠杆菌科细菌对碳青霉烯的耐药性表现不一，本研究肠杆菌科菌中耐药率最高的是沙雷菌属(22．1％)，其次是枸橼酸菌属(9．O％)，肠杆菌属(7．7％)，克雷伯菌属(

7、2．2％)和埃希菌属(0．4％)，未在变形家族细菌中发现对碳青霉烯耐药的菌株。不同菌属中对碳青霉烯耐药细菌的标本来源都以痰液最多，菌株各临床科室分布不一，整体无明显的病区集中趋势，主要分布于重症监护病房(ICU)、神经外科和烧伤科。2、5年间本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯的耐药率呈逐年上升的趋势，且每年的耐药率都高于全国CHINET的监测结果；5年间铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物的耐药率没有明显的上升趋势，但耐药率波动较大，且均高于全国CHINET耐药性监测结果，本院肠杆菌科细菌对碳青霉烯的耐药率低于全国CHINET的监测结果，且5年间对碳青霉烯的耐药率波动不大，呈平

8、稳状态。3、药敏检测结果