糖尿病大鼠肾组织nrf2、trx的表达及金属硫蛋白对其干预作用的研究

《糖尿病大鼠肾组织nrf2、trx的表达及金属硫蛋白对其干预作用的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。黜虢酗新签对泛河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定

2、。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签轹陟．结翩麟蒜沙。f年芗月即目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯二二I==．：⋯⋯．．I英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文糖尿病大鼠肾组织Nrf2、Trx的表达及金属硫蛋白对其干预作用的研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．18附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．36讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”41参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43综述金属硫蛋白的生物学特性及其对肾脏的保护作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·50个人简历⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·51中文摘要糖尿病大鼠肾组织Nrf2、Trx的表达及金属硫蛋白对其干预作用的研究摘要目的：本课题拟建立1型糖尿病大鼠模型，测定大鼠肾组织中氧化应激指标丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC)活性，应用免疫组织化学、反转录PCR等方法检测肾组织的Nrf2、Trx表达情况，并给予金属硫蛋白(metallothionein，MT)干预，探讨糖尿病大鼠肾脏是否存在氧化应激状态及金属硫蛋白的干预效果，以其延缓肾损伤的发生发展。为人类糖尿病肾脏损伤的防治提供试验性的理论依据。糖尿病时机体处于

5、氧化应激状态，其脂质过氧化产物增多，细胞抗氧化能力下降。Nrf2一ARE通路是机体最重要的抗氧化应激通路之一。核因子EF．E2相关因子(Nrf2)在受到活性氧(ROS)的刺激时通过与ARE作用元件相结合，启动下游保护性基因蛋白转录，其中包括硫氧还蛋白(Trx)、醌氧化还原酶(NQ01)、血红素氧合酶1(heineoxygenasel，H0—1)等，提高机体抗氧化能力，减少氧化应激损伤。方法：选择SPF级雄性大鼠48只，体重约180-2209，(购自河北医科大学动物中心)，先适应性喂养1周后，空腹12小时，随机分为正常对照组(NC组，n=

6、12)、糖尿病模型组(DM组，n=12)、糖尿病金属硫蛋白高剂量治疗组(MTH组，n=12)、糖尿病金属硫蛋白低剂量治疗组(MTL组，n=12O其中DM组、MTH组、MTL组大鼠给予腹腔注射链脲佐菌素(65mg／kg)制备糖尿病大鼠模型，NC组则给予等量的柠檬酸缓冲液。72h后检测血糖，血糖≥16．7mmol／L视为糖尿病模型制备成功。MTH组大鼠给予0．5mg／kgMT灌胃，MTL组大鼠给予O．1mg／kgMT灌胃，NC组、DM组每天给予等量的生理盐水灌胃。分别于造模成功后6周、12周末，每组任取6只大鼠，测定24h尿蛋白(24hUP

7、)、血肌酐、尿素氮。并收集肾组织标本，制作组织切片，在显微镜下观察苏木素伊红(髓)染色及糖原染色(PAS)的大鼠肾组织病理变化，检测肾脏丙二醛(MDA)含量、T-AOC活性，免疫组化方法检测Nrf2、Trx的表达，RT-PCR法检测Nrf2、TrxmRNA表达。实验所得数据用均数±标准差(x±S)表示，应中文摘要用SPSS19．0统计分析软件对数据进行单因素方差分析，不满足正态性和方差齐性的数据资料采用非参数检验，以p<0．05有统计学意义。结果：l一般状况：DM组、MT组大鼠在注射STZ后逐渐出现多饮、多食、多尿，反应迟缓，且体重逐渐

8、下降，毛发失去光泽，其中DM组症状明显重于MT组，而NC组大鼠生长发育良好，反应灵敏，饮食正常。2生化指标2．124小时尿蛋白定量：6周末，与NC相比，DM组大鼠24小时尿蛋白水平升高(p<0．05)；与D