文昌鱼斑马鱼早期胚胎发育中gaba,a受体结合蛋白基因的研究

《文昌鱼斑马鱼早期胚胎发育中gaba,a受体结合蛋白基因的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、山东大学博士学位论文文昌鱼斑马鱼早期胚胎发育中GABA<,A>受体结合蛋白基因的研究姓名：梁恺龙申请学位级别：博士专业：发育生物学指导教师：张红卫20040408山东大学博士擘住论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：，兰基!丝It期：竺垒笪关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学

2、校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名理趁导师签名：’暨血互日期：z型山末大学博士学位论文符号说明英文缩写英文全名中文APAlkalinephosphatase碱性磷酸酶BCIPBSADEPCDIGDMFDMSOEDTAEGTAMoPSNBTPBSPCRPVPU5：b。oPo-4．-ohlo‘o’3-ind5-8-4一氯一3．吲哚磷酸盐0ly-t)llOst)hate⋯

3、-⋯’。y⋯LuBovineserumalbum牛血清白蛋白Diethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯Digoxigenin地高辛Dimethylformamid二甲基甲酰胺Dimethylsulfoxide二甲基亚砜Ethylenediaminetetra．aceticacideEthyleneglycolbisf2一amino—ethyl-ether)·tetraaceticacid乙二胺四乙酸乙二醇．双一(2-氨基乙基)四乙酸3。[N—mo。：1鼎i烈．．3．(N一吗啡啉)丙磺酸propane-BIonlacidSJC⋯。“⋯⋯⋯Nitrobluetetrazo

4、lium硝基四氮唑盐Phosphatate—bufferedsalinePolymerasechainreactionPoIyvinylpyrrolidoneUnit磷酸盐缓冲液聚合酶链式反应聚乙烯吡咯烷酮酶活单位3山东大学博士学位论文文昌鱼斑马鱼早期胚胎发育中GABAA受体结合蛋白基因的研究摘要文昌鱼(Amphioxus)属头索动物(Cephalochordata)，代表着从无脊椎动物到脊椎动物进化过程中一个重要的过渡阶段，被认为是现存的与脊椎动物最接近的无脊椎动物，是研究动物进化和动物胚胎发育的典型材料。本文介绍了从cDNA文库得到的一个长度为996bp的cDNA序列，该序

5、列编码117个氨基酸的与其他物种的GABARAPL2同源性很高的蛋白质，故命名为文昌鱼GABARAPL2。由GABARAPL2演绎的蛋白质与人的GABARAPL2、小鼠GABARAPL2相同性均为75％；与果蝇、疟蚊和线虫的相同性分别为64％、64％和61％。利用clustalX1_8l对青岛文昌鱼GABARAPL2和其他同源的已知蛋白进行了比较，同时利用TREEPUZZLE5．O分析获得系统进化树。由系统进化树可见，哺乳动物的GABARAP蛋白分成2部分，其中GABARAP、GABARAPLl和GABARAPL3序列的同源性较高，GABARAPL2与它们的同源性较差，单列一枝

6、。同源性较高的GABARAP、GABARAPLl和GABARAPL3也分为两部分，Ll和L3的同源性很高，而GABARAP则与GABARAPLl和GABARAPL3不在同一枝上。从进化树看出文昌鱼的GABARAPL2是单列一枝的，只是与哺乳动物GABARAPL2的同源性较高一些。SouthernBlotting中，用多种酶切后的基因组DNA与随机引物杂交，结果只有一条带存在，显示在文昌鱼中GABARAPL2可能只有一个拷贝。原位杂交结果显示GABARAPL2在文昌鱼早期发育过程中有两个明显的表达期：在受精卵和早期卵裂时表达；其后在囊胚期和原肠早期没有表达：到晚原肠和神经胚期及以

7、后的各时期又检测到GABARAPL2的表达。早期卵裂存在的GABARAPL2的mRNA可能是母源性表达的结果：而囊胚和原肠早期不表达，可能是经历了和其他大多数动物相似的囊胚中期转化过程；晚原肠时期GABARAPL2的表达量又达到可检测的水平，这个时期的GABARAPL2mRNA应该是合予类型表达的产物。合子型GABARAPL2的表达最初见于原肠晚期在胚孔附近靠近背唇的地方，之后在神经板处有强表达，随着神经管的形成，GABARAPL2在脑泡、神经管、神经肠管和发育中的内4山东太学博士学位论文胚