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《中国迁粉蝶属_鳞翅目_粉蝶科_基于nd_和co_基因部分序列的系统发育关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、ActaZootaxonomicaSinica,35(4):776-781(Oc.t,2010)ISSN1000-0739动物分类学报中国迁粉蝶属(鳞翅目,粉蝶科)基于ND和CO基因部分序列的系统发育关系*汪江尚素琴张雅林西北农林科技大学植保资源与病虫害治理教育部重点实验室,昆虫博物馆陕西杨凌712100摘要测定了中国迁粉蝶属3种4亚种以及迁粉蝶指名亚种5个生态型的线粒体CO基因和ND基因部分序列,以灵奇尖粉蝶为外群,分别采用最大简约法、最大似然法和贝叶斯法构建分子系统树,探讨了中国迁粉蝶属3种4亚种间的系统发育关系,
2、并首次明确了迁粉蝶指名亚种5个生态型的亲缘关系。结果显示在测得的CO基因661bp序列和ND基因472bp序列中,有变异位点227个,简约位点119个,A+T含量(755%)明显偏高。迁粉蝶属4亚种分子系统关系为:(镉黄迁粉蝶指名亚种+((梨花迁粉蝶指名亚种+梨花迁粉蝶海南亚种)+迁粉蝶指名亚种)),迁粉蝶指名亚种5个生态型分子系统关系为:(无纹型+((有纹型+红角型)+(银斑型+血斑型)))。关键词鳞翅目,黄粉蝶亚科,迁粉蝶属,CO基因,ND基因,系统发育.中图分类号Q961迁粉蝶属Catopsilia由Hbner于1
3、819年建立,12实验方法模式种为PapiliopomonaFabricius,隶属于鳞翅目121总DNA提取Lepidoptera,粉蝶科Pieridae,黄粉蝶亚科基本参照Zmimermann等(2000)的方法,在Coliadinae。目前全世界已知9种,分布于亚洲、非此基础上略做改进。取蝴蝶的一只足,加入250L洲及大洋洲等地。中国分布有3种4亚种,主要分提取缓冲液(5mmol/LTris-HC,l25mmol/L布在西南区、华中区和华南区。其中迁粉蝶指名亚NaC,lpH80,25mmol/LEDTA,01%SDS)
4、,用种C.pomonapomona具多型性,各型的外生殖器结构塑料小杵将足捣碎。加入2L蛋白酶K(20mg/相似,且变异连续,又都分布于云南西双版纳地区,mL),混匀,60保温至少3h。经酚和氯仿纯化仅从形态上很难探讨它们之间的系统关系,需借助后,加入2倍体积的无水乙醇沉淀DNA。DNA沉分子手段或其它方法进一步确定。淀经70%乙醇清洗,空气干燥后,溶于50LTE,目前,有关迁粉蝶属分子系统发生关系的研究4保存备用。未见报道。ND和CO基因由于进化速率较快,122PCR扩增线粒体目的基因片段常用于分析亲缘关系密切的种、亚种
5、及地理种群之扩增两种线粒体基因的引物均为通用引物(表间的系统关系(王备新等,2002)。本文对中国分布2),由上海申能博彩生物科技有限公司合成。的迁粉蝶属3种4亚种以及迁粉蝶指名亚种5个生PCR反应体系总体积为50L,其中5uL10态型的线粒体ND和CO基因的部分序列进行测Buffer,7LMgCl2(25mmol/L),75LBSA定,比较这4个亚种在DNA序列上的差异,探讨了(06mg/mL),1LdNTP(10mmol/L),10mol/L它们的分子系统发生关系,并首次明确了迁粉蝶指引物各1L,4LDNA模板溶
6、液(包含10~25ng名亚种5个生态型的亲缘关系。DNA),05UTaq酶,双蒸水补足至50L。反应程1材料和方法序为:94预变性5min;94变性30s,ND基因与11实验材料CO基因分别为48和47复性40s,72延伸研究所用的迁粉蝶属标本来源和信息见表1。30s,35个循环;72总延伸10min。反应产物经野外采集新鲜标本带回实验室,经鉴定后立即取其1%的琼脂糖凝胶电泳检测和GelDos图像分析仪观6条足置于100%的酒精中固定,-20冰箱保存察,经纯化试剂盒纯化,基因片段由南京金思特科技备用。有限公司采用
7、ABI-377基因分析仪测定。科技部基础性工作专项(2006FY110500-3),西北农林科技大学青年科学基金(QN2009033)资助.*通讯作者,E-mai:lsuqinsh@126.com收稿日期:2010-01-25,修订日期:2010-07-15.776Oc.t,2010汪江等:中国迁粉蝶属(鳞翅目,粉蝶科)基于ND和CO基因部分序列的系统发育关系777表1样品来源、信息及GenBank登录号Table1.Thesources,informationandGenBankaccessionNo.ofsamples.
8、GenBank登录号种名编号采集地点采集时间GenBankaccessionNo.SpeciesCodeCollectionlocationCollectiondateCOGe
