重要-轮状病毒四价灭活疫苗的制备及在小鼠的免疫原性研究

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1、万方数据轮状病毒四价灭活疫苗的制备及在小鼠的免疫原性研究姜英，王名强，傅生芳，安红，周旭(兰州生物制品研究所，兰州730046)摘要：制备轮状病毒四价灭活疫苗，观察其在小鼠体内的抗体应答情况。实验采用轮状病毒原液经凝胶过滤层析纯化，灭活后配制四价疫苗，肌肉注射免疫小鼠，ELISA法测定小鼠血清IgA、IgG。将单价c1、G2、G3、G4型灭活病毒原液及四价轮状病毒灭活疫苗免疫小鼠后，均可刺激产生针对RV的高水平的特异性Igc抗体，但IgA应答较弱。表明四价轮状病毒灭活疫苗在小鼠中具备很好的免疫原性。关键词：轮状病毒四价灭活疫苗，小鼠免疫，IgG，IgA中

2、围分类号：R372‘2文献标识码：A文章编号：1005-5673(2008)04·O007—04PreparationofthetetravalentinactivatedrotavirusvaccineandevaluationofitsimmunogenidtyinmiceJIANG1，jing。WANGMing-qiang，FUSheaf-fang-eta1．(LandwuInstituteo／尉比睁越Products-Lanzlwu730046，China)Abstract：Thetetravalentinactivatedmtavirusvac

3、cineWaftpreparedandtheantibodyresporisewasobservedinmice．Therotavimsstocksolutionwasinactivatedandpurifiedwitllgel．filtrationchromatography．The6Uedtetravalemrotavirusvac-cinewasinjectedintoBALB／cmiceinordertodetecttheantibodyresponsesagainsttotheG1。G2IG3，G4monovalentvaccineandtet

4、ravalentvaccineusingELISA．Theresultsshowedthattheinactivatedtetravalentrotavirusvaccillecanin-ducethehighlevelandspecificIgGantiboy-buttheIgAlevdislow．Theinactivatedtetravalentrotavlrusvaccineisofthegoodimmunogenicity．Keywords：Inaetivedtetravalentrotavirusvaccine；Micemodel；IgG；Ig

5、A轮状病毒是引起全世界儿童重症腹泻的首要原因，每年导致全球35—60万五岁以下儿童死亡¨】。有效接种轮状病毒疫苗是减轻疾病负担最经济的方法。全世界已对多种疫苗候选株开展了不同动物模型试验或临床试验¨引。许多疫苗候选株以减毒活轮状病毒毒株为基础通过口服模拟自然感染的过程进行免疫。同时，灭活疫苗和第二代亚单位疫苗也在研发中。它们被设计为肌肉注射或通过母代服用，已在不同动物模型中进行了评估¨．．J。轮状病毒口服活疫苗与这两种疫苗相比，存在以下几个方面的缺陷：①可被经由胎盘和母乳传递的母体抗体削弱甚至使其不起作用；②可在疫苗株和野毒株之间发生重配；③对于儿童可使

6、其形成先天性或获得性的免疫缺陷‘51。实验中以人类感染的主要轮状病毒血清型Gl(W284)、G2(D36)、G3($25)、G4(L8)为基础，制备轮状病毒四价灭活疫苗，免疫小鼠，检测其血清抗收稿日期：2008—09·16；修回日期：2008一10—10作者简介：姜英(1973-)，女。硕士。助理研究员，主要从事病毒性疫苗研究。体，对灭活轮状病毒的免疫原性进行研究。材料和方法7l轮状病毒四价灭活疫苗的制备w284(G1)、D36(G2)、$25(G3)及LH(c4)型轮状病毒细胞培养液经凝胶过滤层析纯化后，收获活性峰，ELISA法测定活性，并测定蛋白含量

7、，B一丙内酯灭活后，四型等量混合配制成四价灭活疫苗备用。2免疫动物健康BAL8／c小鼠，雌性，12—149，由兰州生物制品研究所实验动物室提供。3免疫程序将小鼠随机分为十四组，每组10只，分别以Gl的第一峰5¨g／ml、10嵋Jml，G2的第一峰5pg／lIll、10t蝎／ml，G3的第一峰5∥nd、lOp∥IIll，C,4的第一峰5¨g／rrd、10t,#n：ll，G1的第二峰10斗g／ml，G2的第二峰lO∥lIll，G3的第二峰10tLg／ml，G4的第二峰10嵋／ml及四价轮状病毒灭活疫苗10斗g／ml、20pg／mi为抗原经肌肉注射，免疫剂量为

8、0．2ml，免后3周以相同剂量免疫第二针及第三针。二针免后3周、三针免后的2周、