水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗的研究及其免疫效果的评价

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1、水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗的研究及其免疫效果的评价PreparationandEvaluationofImmuneEffectsofthebivalentinactivatedvaccineagainstminkpasteurellosis作者姓名：刘旭平刘旭平专业名称：兽医硕士指导教师：母连志副教授学位类别：兽医硕士答辩日期：2015年6月3日中文摘要水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗的研究及其免疫效果的评价水貂巴氏杆菌病（Minkpasteurellosis）是由多杀性巴氏杆菌（Pasteurellamultocida）引发的水貂

2、的一种急性、热性、败血性传染病，以出血性败血症及传染性肺炎为主要特征。本病常发生于春、秋两季，多呈散发，有时呈地方流行性，热带区域比温带区域发病率高，幼龄水貂感受性最强，发病率与死亡率均较高，该病的发生与流行给我国的水貂养殖业造成了严重的经济损失，因此在我国某些水貂养殖密集性地区进行水貂巴氏杆菌病病原的流行血清型研究，对于水貂巴氏杆菌病的防治有重要意义。目前，我国尚未有国家认证的预防水貂巴氏杆菌病的疫苗，且多杀性巴氏杆菌血清型众多以及其耐药性的增强，这给水貂巴氏杆菌病的预防和治疗带来了诸多困难。为了有效地预防我国的水貂巴氏杆菌

3、病，本研究采集了疑似水貂巴氏杆菌病病料进行病原的分离与鉴定，并进行了血清型分型、药物敏感性试验，选择致病性强、优势流行血清型菌株研制出水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗，并对其免疫效果进行了评价。首先，对从山东地区采集的2012~2013年疑似水貂巴氏杆菌病病料进行了病原的分离与鉴定。结果显示，从采集的53份疑似水貂巴氏杆菌病病料中检出多杀性巴氏杆菌28株，占总病例的52.8%。对分离菌株进行血清型分型，结果表明血清A型多杀性巴氏杆菌是主要流行型，占67.9%；血清B型是次要流行型，占32.1%。此外还对分离菌株进行了抗生素药物敏感性

4、试验，结果表明大多数的分离菌株对多西环素、丁胺卡那霉素高度敏感。其次，通过对分离菌株致病力的测定，从分离菌株中选出连续传代对多杀性巴氏杆菌的菌体含量、致病力以及免疫原性均保持稳定的菌株血清A型WF403、血清B型WF405，将其4~6代菌株作为疫苗株来制备用于预防水貂巴氏杆菌病的二价灭活疫苗；对疫苗菌株培养条件如温度、培养时间等进行优化，制备了二批次的水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗：2014615、2014624；经物理性状检验、无菌检验、硫柳汞残留量及甲醛残留量的检验、超剂量安全性检验后，二批次的水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗的质量

5、均合格，可以继续对灭活疫苗的免疫效果进行评价。I最后，对研制的水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗进行了最小免疫剂量的测定以及免疫效果的评价。研究结果显示，该疫苗对水貂的最小免疫剂量是0.25mL，其常规免疫剂量是1.0mL；水貂在接种疫苗后14~21d，机体内的抗体水平达到高峰；测定水貂巴氏杆菌病二价灭活疫苗的免疫保护期至少是120d；该疫苗保存在2~8℃的条件下在9个月内对其免疫效果无显著的影响。疫苗进行临床试验的结果显示，进行免疫的水貂发病率为0.041%，显著低于未免疫时的发病率，说明此疫苗用于预防我国的水貂巴氏杆菌病具有良好的

6、效果。本研究针对我国多杀性巴氏杆菌的优势流行血清型，研究制备了用于预防水貂巴氏杆菌病的二价灭活疫苗，为我国预防水貂巴氏杆菌病的发生奠定了理论依据和实践基础。关键词：水貂巴氏杆菌病；多杀性巴氏杆菌；二价灭活疫苗；免疫效果IIAbstractPreparationandevaluationofimmuneeffectsofthebivalentinactivatedvaccineagainstminkpasteurellosisMinkpasteurellosisisanacute,thermalresistance,septic

7、infectiousdiseasescausedbypasteurellamultocidaandcharacterizedbyhemorrhagicsepticemiaandinfectiouspneumoniamainly.Thediseaseoftenoccursinspringandautumnseason.Itisdistributedanditisalocalepidemicsometimes.Youngminksweremostsensitivewithhighmorbidityandmortality,caus

8、ingseriouseconomiclossesinourcountry.Therefore,itwasveryimportantforthepreventionandcureofminkpasteurellosistoimplementanpopularityofpatho