高速逆流色谱法分离茶黄素条件的优化

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1、※分析检测食品科学2009,Vol.30,No.06191高速逆流色谱法分离茶黄素条件的优化王坤波1,2，刘仲华1,2,*，黄建安1,2，刘芳1,2，龚雨顺1,2，潘宇1,2，黄浩1,2(1.湖南农业大学茶学教育部重点实验室，湖南长沙410128；2.湖南农业大学湖南省天然产物工程技术研究中心，湖南长沙410128)摘要：优化高速逆流色谱分离4种茶黄素的方法。两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸(1:5:1:5:0.25，V/V)，固定相为体系的上相，下相为流动相，流速为2ml/min，仪器转速700r/

2、min，进样量30mg。从茶黄素复合物中分离纯化得到茶黄素、茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3＇-没食子酸酯和茶黄素-3,3＇-双没食子酸酯，尤其使得两种酯溶性茶黄素(茶黄素-3-没食子酸酯、茶黄素-3＇-没食子酸酯)达到较好的分离。关键词：高速逆流色谱；分离；茶黄素OptimizationofSeparationConditionsofTheaflavinsbyHigh-speedCountercurrentChromatographyWANGKun-bo1,2，LIUZhong-hua1,2,*，HUANGJia

3、n-an1,2，LIUFang1,2，GONGYu-shun1,2，PANYu1,2，HUANGHao1,2(1.KeyLaboratoryofTeaScience,MinistryofEducation,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China；2.HunanProvincialResearchCenterforNaturalProducts,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)Abstract：I

4、nthisstudy,high-speedcountercurrentchromatography(HSCCC)wasusedtoseparatetheaflavins.Theoptimizedtwo-phasesolventsystem,flowrate,revolutionspeedandinjectionamountofHSCCCwerehexane-ethylacetate-methanol-water-aceticacid(1:5:1:5:0.25,V/V),2ml/min,700r/minand30mg,

5、respectively.Theupperphasewasusedasthestationaryphase,whilethelowerphasewasthemobilephaseofHSCCC.Undertheseconditions,fourtheaflavinsincludingtheaflavin(TF1),theaflavin3-gallate(TF2A),theaflavin3＇-gallate(TF2B)andtheaflavin3,3＇-digallate(TF3)wereseparatedoutfro

6、mcrudeextract.Especially,twokindsofestertheaflavins,TF2AandTF2Bwerebetterseparated.Keywords：high-speedcountercurrentchromatography(HSCCC)；separation；theaflavins中图分类号：R917文献标识码：A文章编号：1002-6630(2009)06-0191-05茶黄素是多酚类物质氧化形成的一类能溶于乙酸乙困难，而直接从红茶中分离茶黄素单体更加困难,在国酯的、具有苯并卓

7、酚酮结构的化合物的总称，其中茶内外都很难买到茶黄素单体的标准品。为此，研究如黄素(TF1)、茶黄素-3-没食子酸酯(TF2A)、茶黄素-3＇-何利用酶工程合成茶黄素，具有重要的理论与实际意没食子酸酯(TF2B)和茶黄素-3,3＇-双没食子酸酯(TF3)是义。同时，如何采用高效分离方法制备分离茶黄素单红茶中4种主要茶黄素[1-2]。红茶中茶黄素类的含量一体，对茶黄素的科学研究和药理功能研究有极大的推动般为0.5%～2.0%，它们是红茶中的主要成分，对红茶作用。茶黄素的分离主要采用SephadexLH-20柱色谱[12-

8、13]、的色香味及品质起着决定性的作用，是红茶汤色“亮”制备高效液相色谱[14-15]和高速逆流色谱[12-13;15-17]法。高速的主要成分，滋味强度和鲜爽度的重要成分[1-2]。茶黄逆流色谱(HSCCC)是一种不使用固态支撑体或载体的液液素不仅是红茶的重要品质成分，而且具有多种与人体健分配色谱技术。它无需任何固态载体，而是借助螺旋康有关的