碳酸盐碱胁迫下尼罗罗非鱼氨代谢途径与Rh蛋白氨转运作用.pdf

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1、学校代码：10264研究生学号：M150107154上海海洋大学硕士学位论文碳酸盐碱胁迫下尼罗罗非鱼氨代谢题目：途径与Rh蛋白氨转运作用AmmoniametabolismpathwayandammoniatransportofRhproteinsof英文题目：Oreochromisniloticusunderthestressofcarbonatealkalinity专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：水产动物遗传育种姓名：涂翰卿指导教师：赵金良教授二O一八年三月十五日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道

2、德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关

3、数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注中国水产科学院东海水产研究马凌波研究员主席所崔映宇同济大学副教授委员颜标复旦大学研究员委员张瑞祺上海海洋大学博士秘书答辩地点生命学院C楼217答辩日期2018.5.22上海海洋大学硕士学位论文碳酸盐碱胁迫下尼罗罗非鱼氨代谢途径与Rh蛋白氨转运作用摘要尼罗罗非鱼(Oreochromis

4、niloticus)是自上世纪80年代被引入中国，因为其生长速度快，迅速成为我国重要的淡水经济鱼类，同时又因为其表现出对盐碱水体较强的耐受性，可以作为耐盐碱养殖品种改良的候选材料。本论文首先评价了尼罗罗非鱼耐盐碱选育三代鱼苗盐碱耐受性及鱼种盐碱生长指标；进一步研究在碳酸盐碱胁迫下，尼罗罗非鱼氨代谢途径（谷氨酰胺代谢途径和尿素代谢途径）时序以及鳃组织Rh蛋白的氨转运作用，主要研究结果如下：（1）为评估尼罗罗非鱼盐碱选育三代的盐碱耐受性能和生长性能，在淡水水箱（0.6m×0.4m×0.5m）中，进行了盐碱选育三代鱼苗与对照组（

5、非选育群体）盐、碱慢性致死比较试验；同时在户外水泥池（6.0m×5.0m×1.6m）中，设置淡水组、盐度组（10g/L）、盐碱混合组（10，2）g/L、（10，4）g/L和（10，6）g/L（分别用S0A0、S10A0、S10A2、S10A4和S10A6表示），比较了选育三代鱼种在不同盐碱环境中的生长特性。慢性致死试验结果表明，选育三代与对照组的半致死盐度分别为39.63±2.12g/L、31.42±2.42g/L，半致死碱度分别为13.94±0.25g/L、11.26±0.15g/L。60d的生长试验表明，在S10A0、

6、S10A2、S10A4、S10A6组中，随着碱浓度的逐步增加，选育三代与对I上海海洋大学硕士学位论文照组日均质量增加率均呈下降趋势，在相同条件下，选育三代的日均质量增加率均显著大于对照组（P<0.05）。（2）为了解罗非鱼在碱水环境适应过程中的氨代谢机制，将在2、4、6g/LNaHCO3碳酸盐碱水环境中进行急性胁迫。检测胁迫72h内的血氨浓度，肝、肾、鳃组织及水体、尿液、血液尿素浓度，肝、脑、鳃谷氨酰胺(Gln)浓度，肝、脑谷氨酰胺合成酶(GS)活性，肝氨甲酰磷酸合成酶(CPS)活性的变化，以及不同组织中GS、CPS、谷氨

7、酰胺酶(GLS)基因mRNA的表达变化。结果表明，急性胁迫下血氨浓度上升，于12h到达峰值。随着血氨升高，各组织中的尿素浓度0-6h快速升高，CPS活性0-2h快速升高，基因相对表达量0-24h升高，表明尿素代谢途径0-6h内启动。肝谷氨酰胺浓度0-6h快速升高到达峰值，肝GS活性0-6h和12-24h快速升高，组织中GS、GLS基因相对表达量在0-24h升高，表明谷氨酰胺代谢途径0-6h内启动。结果表明，在碳酸盐碱胁迫后，尼罗罗非鱼0-6h内同时启动了尿素代谢途径与谷氨酰胺代谢途径，共同参与血氨调节过程。（3）为了解碳酸

8、盐碱环境下罗非鱼氨转运途径，将尼罗罗非鱼同时进行急性碱度胁迫（2、4、6g/L）和慢性碱度胁迫，检测胁迫后120h内的血氨浓度，鳃组织中Rhag、Rhbg、Rhcg1和Rhcg2基因mRNA表达变化，并观察鳃组织中Rh糖蛋白的免疫组化阳性反应。结果表明，急性碱度胁迫下，血氨在12h内快速升高到达峰值，四