jnk信号转导通路在cd133+肝癌干细胞淋巴道转移潜能中的作用机制

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1、中图分类号密级JNK信号转导通路在CD133+fIq:癌干细胞淋巴道转移潜能中的作用机制CD133+hepaticcancerstemcellsarecorrelatedwithlymphaticmetastasisviaJNKsignaltransductionpathway计:学位论文:9l页表格:5个衣恰:)7l’插图:16幅金艳玲指导教师:李连宏教授申请学位级别:博士学位学科(专业):病理学与病理生理学培养单位:大连医科大学完成时间:二。一三年五月答辩委员会主席:4IIllllllUlIIIIilllllllItJlIIIIIIllIY23117

2、86独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部

3、或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”):i.保密口,在一年解密后适用本授权书。2.不保密口。作者躲懒吼厶解厂月矽日导师日獬年j月Ⅶ10目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OODOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12第一部分Hca.F和Hca.P细胞株中肝癌干细胞数量及克隆能力的比较(一)前言

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12(一)日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯一“一⋯⋯一⋯..⋯”一⋯“⋯⋯⋯(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131.材料⋯··⋯⋯·⋯⋯·⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯··⋯·⋯··⋯··⋯··⋯.131.1细胞系和动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131.2仪器及主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132.方法⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯··⋯⋯·⋯⋯⋯·⋯⋯⋯142.1Hca.F细胞和Hca。P细胞的复苏与培养⋯0o0o⋯⋯142.2肝癌于细胞体外成球实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.3肝癌干细

5、胞球比例测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.4流式细胞仪检测CDl33+细胞的比例⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.5统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151.Hca—F和Hca.P细胞株中肝癌干细胞球的培养⋯152.Hca.F和Hca.P细胞中肝癌干细胞球比例的测定153.流式细胞仪检测Hca—F和Hca.P细胞株中肝癌干细胞的数量⋯····⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··OO9O16(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯19(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20第二部分Hca.F和Hca.P中CDl33+肝癌干细胞的分选及体外增殖、迁移和侵袭能力比较(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(一)日!J舌”“““⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一24(二)材料和方法⋯OOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯241.材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯241.1细胞系和动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯241.2仪器及主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252.方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯252.1Hca—F细胞和Hca—P细胞复苏与培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯262.2免疫磁珠法(MACS)分选Hca.F和Hca—P中CDl33+肝癌干细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯262.3CCK8法检测Hca.F和Hca.P中CDl33+肝癌干细胞及CDl33.细胞增殖能力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯QOO⋯⋯272.4细胞迁移能力实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272.5细胞侵袭能力实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272.6Westernblot检测CDl33表达情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282.7统计学处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(三)结

8、果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281.MACS分选CD133+

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