hpv基因分析在宫颈上皮内瘤变中的作用和意义

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1、宫颈上皮内瘤变中HPV型别、负荷量的研究及HPV58型L1基因多态性分析摘要目的探讨不同宫颈上皮内瘤病变(CervicalIntraepithelialNeoplasia，CIN)中人乳头瘤病毒(HumanPapillomaviruses，HPV)基因型及HPV58L1基因序列多态性分析。探讨宫颈液基细胞学阴性的HPV感染与病毒负荷量、年龄因素及宫颈病变程度的关系。方法1．(1)采用薄层液基细胞学(LCT)联合HC2检测HPV—DNA进行宫颈癌机会性筛查，选取LCT及HPVDNA检测均为阳性，且行宫颈锥形切除术后有明

2、确组织病理学诊断者121例。宫颈上皮内瘤变I级(CINI)35例，宫颈上皮内瘤变工工级(CIN2)35例，宫颈上皮内瘤变III级(CIN3)51例。(2)行宫颈锥形切除术后将病变组织制成蜡块，进行切片、制片。(3)通过高通量和芯片捕获技术检测121例标本中感染HPV基因型，并获得HPV58的L1基因序列。(4)应用DNAStar软件对所得出的序列结果进行比较分析Ll基因的多态性。2．2011年5月至2012年12月在青岛大学医学院附属医院黄岛院区，采用薄层液基细胞学(LCT)联合HC2检测HPV-DNA进行宫颈癌机会

3、性筛查，选取结果为LCT阴性、HPV阳性患者575例，全部行阴道镜下宫颈活检且有病理诊断。比较年龄、HPV病毒负荷量及病变级别之间的关系。结果1．121例不同级别宫颈上皮内瘤变中，检出HPV共79例，阳性检出率是(79／121)65．29％。79例HPV检出患者中，58例单一型别感染，检出率是(58／79)73．42％，21例多重感染，检出率是(21／79)26．58％。单一感染中，HPVl6检出率最高，为(31／58)53．45％，其次是HPV58，检出率为(10／58)17．24％。多重感染中，以HPV58和HP

4、Vl6的多重感染为主，其中10例包含HPV58，检出率为(10／21)47．62％，11例包含HPVl6，检出率为(11／21)52．38％。HPV58+HPVl6检出率最高，为(4／21)19．05％，其次是HPVl6+HPV33，检出率为(2／21)9．52％。2．20例HPV58阳性标本中，全部测出L1基因序列，存在6个突变位点，分别是nt6014、nt6325、nt6359、nt6411、nt6416、nt6433。其中nt6014、nt6359位点变异导致所编码的氨基酸发生改变。且nt6433位点A／G突变

5、存在于全部20例标本中，提示可能具有地域性特点。3．575例患者中宫颈活检病理诊断宫颈浸润癌1例，CIN3、CIN2、CINl分别为26例、17例、46例，慢性宫颈炎485例。30-49岁组≥CIN3的患病风险是≥50岁组患者的1．556(0．357-6．776)倍；HPV病毒高负荷量组的患病风险是低负荷量组的2．017(0．760—5．350)倍。30-49岁年龄段组HPV病毒低、中、高负荷量者≥CIN2的患病率分别为3．2％、8．4％和lo．5％(∥=6．684，P=O．0009)，差异具有统计学意义(P<0．0

6、01)。说明，在30-49岁年龄段，≥CIN2发生率随着HPV病毒负荷量升高有上升趋势。结论1．不同级别宫颈上皮内瘤变中HPV感染主要型别为HPVl6型及HPV58型，其中HPV58型的L1基因存在多个突变位点。2．在LCT阴性、HPV阳性患者中，30-49岁年龄组高度病变患病率明显增加，且病毒负荷量越高，其患病率越高。由此提示，临床上30—49岁年龄段妇女，HPV负荷量≥IOORLU／CO，及时的阴道镜检查，发现可疑病变行宫颈活检，能够有效地进行宫颈病变及宫颈癌的尽早发现和及时治疗，预防病变进展。硕士研究生：崔虹飞

7、(妇产科)指导教师：戴淑真教授【关键词】人乳头瘤病毒；宫颈病变；L1基因；基因多态性；病毒负荷且里ThestudyoftheHPVtypesandvirusloadincervicalintraepithelialneoplasiaandanalysisofthemutationsofHPV58L1geneAbstractobjective1．ToinvestigatethegenotypeofHPVindifferentcervicalintraepithelialneoplasialesionsandthegen

8、epolymorphismofL1geneofHPV58type．2．TodiscusstherelationofHPVload．thepatients’ageandcervicallesionsinthepatientswhohaveanegativeLiquid—BasedCytologyandpositiveHPV．Methods1．(1