大孔吸附树脂对丁香叶中丁香苦苷类成分富集工艺研究

《大孔吸附树脂对丁香叶中丁香苦苷类成分富集工艺研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、http://www.paper.edu.cn大孔吸附树脂对丁香叶中丁香苦苷类1成分富集工艺研究刘欣，高月娟，王建明，许贵军，薛红梅黑龙江中医药大学中医药研究院，哈尔滨(150040）E-mail：wangjianming@hljucm.net摘要：目的：研究大孔吸附树脂富集丁香苦苷类成分的工艺条件及参数。方法：以丁香叶中主要有效成分丁香苦苷为考察指标，建立HPLC分析方法，通过考察6种大孔吸附树脂对丁香苦苷的吸附分离性能，筛选出AB-8树脂作为分离纯化丁香苦苷类成分的介质，并对AB-8树脂的吸附性能进行研究，考察富集

2、丁香苦苷类成分的最佳工艺条件。结果：丁香叶经水提醇沉浓缩后，以AB-8型大孔树脂为吸附剂，4BV的水洗脱出去杂质后，收集5BV的50%乙醇洗脱液为最佳工艺条件。结论：大孔吸附树脂分离工艺可作为富集丁香苦苷类成分的有效方法，并为丁香叶药材的质量控制和新型给药系统的研究奠定基础。关键词：丁香叶；大孔吸附树脂；丁香苦苷；富集丁香叶为木樨科植物紫丁香（syringaoblatalindl.）、洋丁香（syringavulgarisL.）和朝鲜丁香（syringadiatataNakai）的干燥叶，具有广谱抗菌和抗病毒作用，收载

3、于黑龙江省药品标准，在东北地区分布广泛，资源丰富。丁香叶制剂炎立消胶囊、片剂收载于《中华人民共和国部颁药品标准》，用于治疗急性肠炎、菌痢、上呼吸道感染及急慢性扁桃体炎等感染性疾病，疗效显著。丁香叶的药效物质基础主要为丁香苦苷、3，4二羟基苯甲酸、3，4二羟[1]基苯乙醇、酪醇、反式对羟基肉桂酸等，其中以丁香苦苷含量较高，为主要活性成分。由于大孔吸附树脂对中药提取物中苷类、黄酮、生物碱的分离纯化效果较好，并且具有吸附性[2]强、解吸容易、可反复使用等优点，因此本文采用大孔吸附富树脂柱层析结合HPLC在线检测，对丁香苦苷类

4、成分的富集工艺进行研究，实现丁香叶制剂高效、低剂量的科学化改造，为新型给药系统的研究奠定基础。1.实验材料1.1仪器Waters600E-2487型高效液相色谱仪；Millennium32色谱工作站数据处理系统；RE-52AA旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；SHB-Ⅲ循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂）；THZ-82型水浴恒温振荡器（江苏金坛市望华科教仪器厂）；AG135型电子天平（瑞士METTLER-TOLEDO公司）。1.2药材及试剂丁香叶（syringaoblatalindl.）采自黑龙江中医药大学药圃，经黑龙江

5、中医药大学生药学教研室鉴定为木樨科植物紫丁香。丁香苦苷对照品（自制，UV、IR、MS、HNMR等波谱分析确定为丁香苦苷，经高效液相色谱归一化法计算，纯度为98.8%）AB-8型、D101型、X-5型、NKA-Ⅱ型大孔吸附树脂（南开大学化工厂）；HPD400型、HPD500型大孔吸附树脂（河北沧州宝恩化工有限公司）。实验中所用水为超纯水，甲醇为色谱醇，其余试剂均为分析纯。1本课题得到2006年教育部博士点专项基金项目（20060228005）的资助。-1-http://www.paper.edu.cn2.方法与结果2.1

6、丁香苦苷的定量方法2.1.1色谱条件及系统适应性色谱柱：Diamonsil(TM)C18柱（4.6mmX200mm，5µm）；流动相：甲醇-水（40：60）；-1流速：1.0mL.min；检测波长：221nm；柱温：25℃。在上述色谱条件下丁香苦苷对照品的保留时间为22.358min，理论塔板数以丁香苦苷计算应不低于2500，色谱图见图1和图2。图1丁香苦苷对照品图2丁香叶供试液2.1.2对照品溶液的制备精密称取丁香苦苷对照品1mg，置10mL量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。2.1.3检测波长的选择精密吸取对

7、照品溶液1mL于10mL量瓶中，用流动相溶液定溶，并以流动相溶液作为参比溶液，在190～600nm波长范围内进行全波长扫描，结果显示丁香苦苷在221nm处有一最大吸收峰，故选定221nm为检测波长。2.1.4线性关系考察精密丁香苦苷对照品溶液2.5，5，10，15，20µl进样，测定峰面积，以进样量（mg)为-2-http://www.paper.edu.cn横坐标，以峰面积积分值为纵坐标，作图，得一直线，其回归方程为:64Y=2.79×10X-8.23×10r=0.999983丁香苦苷进样量在0.17375～1.39

8、µg呈良好的线性关系。2.1.5方法学考察实验结果:精密度RSD=1.63%、稳定性RSD=1.42%、重复性RSD=2.02%；加样回收率试验结果RSD=2.66%。2.2丁香叶供试品溶液的制备丁香叶适当粉碎，分别加16倍量的水煎煮2h，加12倍量的水煎煮1h，过滤，合并滤液，浓缩至含2g生药/mL，加乙醇至含醇量为70%，醇沉