ne在离体血脑屏障缺血性损伤中的作用研究

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1、重庆医科大学硕士学位论文NE在离体血脑屏障缺血性损伤中的作用研究姓名：李曼霞申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：董志20070501重庆医科大学硕士研究生学位论文英文缩写AQP-4ASBBBBMVECBBBMDAB英汉缩略语名词对照英文全称aquapofin-4as自rocyteblood-brainbarrierbrainmicrovascularendothelialceilsblood-brainbarriermodeldiaminobenzidineDMEMdulbecco’SmodifiedEagle。SmediumDMSOdim

2、ethylsulfoxideEDAedaravoneEDTAethylenediaminetetra-aceticacidenzyme一1inkedimunoabsorbentEUSAassayFBSfetalbovineserumggramHRPhorseradishperoxidaseGFAPglialfibrillaryacidicproteinhhourICCimmunocytochemistryI／Rischeraia／reperfusionLDHlactatedehydrogenasemgmilligramrainminutemlm

3、illiliter肼3廿，5-diIIletllyl血yi820l-2-ylO-2,5-dipheyl中文全称水通道蛋白一4星形胶质细胞血脑屏障脑微血管内皮细胞血脑屏障模型二氨基联苯胺Dulbecco改良的Eagle培养基二甲基亚砜依达拉奉乙二胺四乙酸酶联免疫吸附试验胎牛血清克辣根过氧化物酶胶质纤维酸性蛋白小时免疫细胞化学缺血／再灌注乳酸脱氢酶毫克分毫升四甲基偶氮唑蓝重庆医科大学硕士研究生学位论文NCNEODOGDPBSPFAPMNrpmSivTBTEMnormalcontrolneutrophilelastaseopticaldemityox

4、ygenglucosedeprivationphosphate-bufferedsolutionparaformaldehydepolymorphonuelearleukocyterevolutionsperminutesivelestatsodiumtrypanbluetransmissionelectronmicroscope2正常对照弹性蛋白酶光密度氧糖剥夺磷酸盐缓冲液多聚甲醛中性粒细胞每分钟转速西维来司钠台盼蓝透射电子显微镜重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果．据我所

5、知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意．申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．学位论文作者签名：趣学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期问论文工作的知识产权单位属重庆医科大学．本人保证毕业离校后。发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学．学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文

6、的复印件和磁盘．允许论文被查阅和借阅．学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文．论文作者签名：指导教师签名：力餮仗日期：竺：．Z：兰：竺重庆医科大学硕士研究生学位论文NE在离体血脑屏障缺血性损伤中的作用研究中文摘要目的：研究NE对缺血再灌注状态下离体星形胶质细胞的作用及NE抑制剂西维来司钠的保护作用。明确NE是否有通过损伤血脑屏障等机制加重缺血／再灌注后的脑损伤，NE能否成为脑血管疾病治疗一个新的作用靶点。研究NE抑制剂西维来司钠对缺血再灌注造成的血脑屏障损伤是否有保护作用，能否作为一种新型的神

7、经保护剂用于脑血管疾病的临床治疗。方法：取生后2天的wistar大鼠的大脑皮层进行离体星形胶质细胞原代纯化培养，随机分为7组：正常对照组、缺血／再灌注模型组；模型+中性粒细胞损伤组；模型+中性粒细胞损伤+西维来司钠组；模型+中性粒细胞损伤+依达拉奉组。其中西维来司纳药物干预组又根据药物浓度的不同再分为低、中、高浓度三个亚组。建立星形胶质细胞对缺血再灌注的细胞实验模型。借助相差倒置显微镜和免疫细胞化学的方法对星形胶质细胞的形态学影响。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法，乳酸脱氢酶活性(LDH)测定评价细胞活力，并通过免疫细胞化学的图像分析等方法研

8、究星形胶质细胞在缺血再灌注状态下的AQP4蛋白表达的变化。利用成功传代培养的大鼠星形胶质细胞和微血管内皮细胞，配合coming公司的transwell