亚低温延缓脑创伤后神经元迟发性凋亡进程的研究

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1、万方数据368TianjinMedJ，May2008，Vol36No5亚低温延缓脑创伤后神经元迟发性凋亡进程的研究木孙洪涛刘晓智王志强张赛△摘要目的：观察亚低温对脑创伤后神经元程序性细胞死亡进程的延缓作用，从细胞水平测试亚低温治疗的意义。方法：分离培养乳鼠脑皮质神经元，免疫荧光方法鉴定；部分神经元反复冻融，将细胞裂解液加入正常神经元细胞表面，分别置于33℃和37℃温控培养箱中培养；测定培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量，TUNEL法检测原位凋亡细胞数量，以hoechst33258标记法检测亚低温对凋亡速度的影响。结果：免疫荧光检测神经元特异

2、标记蛋白神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白(MAP一2)阳性表达率分别为(74．7±8．4)％和(80．1±6．7)％。培养于33。c的LDH水平和发生原位凋亡的细胞数量均低于37℃培养组(P<0．05)，hoechst33258标记法显示亚低温可延缓神经元调亡速度(P<0．05)。结论：亚低温可明显减缓脑创伤后神经元调亡进程，为其他治疗争取救治时间。关键词低温颅脑损伤细胞凋亡神经元PostponedEffectofMildHypothermiaonNeuronApoptosisFollowingTraumaticBrainInju

3、rySUNHongtao，LIUXiaozhi，WANGZhiqiang，ZHANGSaiDepartmentofNeurosurgery，Theaffitio抛,lHospitalofMedicalCollegeofChinesePeople’sArmedPoliceForce，Tianjin300162，ChinaAbstractObjective：Toobservethepostponedeffectofmildhypothermiaonneuronapoptosisprocessaftertraumaticbraininjury，an

4、dstudythepositivesignificanceatcellularlevel．Methods：Theneuronswereisolatedfromthesucklingratbraincodex．andidentifiedbyimmunofluorescenceassay．Partofneuronswasfrozenandthawedrepeatedly，andthelysatewasaddedontothenormalneurons．Thentheneuronswereculturedintemperature—controll

5、edincubatorat33oCor37℃respectively．Thelacticaciddehydrogenase(LDH)levelwastestedatdifferenttimepoint．TheapoptosiscellpopulationwasdetectedbyTUNEL，andcellularnucleuswaslabeledbyhoechst33258toobserveneuronapoptosisspeed．Results：Theresultsfromimmunofluorescenceindicatedthatcul

6、turedceilswerepositivelyexpressedneuronspecificenolase[NSE(74．7±8．4)％]andmicrotubule—associatedprotein一2[MAP一2(80．1±6．7)％】．Atthesametimepoint．theLDHlevelandapoptosiscellpopulationcuhuredat33℃werelowersignificantlythanthoseofculturedat37℃．andthecellapoptosisspeedat33℃Wasslow

7、erthanthatof37℃(P<0．05)．Conclusion：MildhypothermiaCallmarkedlypostponetheneuronapoptosisprocessaftertraumaticbraininjury，whichreducesthedegreeofinjury，andprolongsthetimeofremedywindow．Keywordshypothermiacraniocerebraltraumaapoptosisneurons亚低温在救治重型颅脑创伤severetraumaticbraininj

8、ury，sTBI)方面作用肯定，被认为是当前最有应用前景的基础救治措施之一fl】。有研究表明亚低温治疗虽然可以明显延长sTBI患者的生存期，减少并发症的发生率，但在