重组催乳素表面抗原对皖西白鹅就巢和产蛋的影响

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1、AnhuiAgriculturalUniversityMasterDegreeDissertationEffectofActiveImmunizationagainstRecombinantProlactinontheOnsetofBroodinessandEggLayinginWanxiWhiteGoosePostgraduate:YanHeSupervisor:Prof.Zhao-YuGengSpecialty:AnimalGenetics,BreedingandReproductionResearchField:AnimalMolecularGeneticsCo

2、llegeofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei230036Hefei,Anhui,P.R.ChinaJune,2013本论文受以下项目资助国家水禽产业体系(CARS-43-31)安徽省级高校优秀青年人才基金项目(2012SQRL062ZD)Thispaperissupportedby:NationalWaterIndustrySystem(CARS-43-31)TheProjectSupportedbyExcellentYoungTalentsFundofAnhuiProvince

3、(No.2012SQRL062ZD)摘要皖西白鹅是我国优良的安徽地方中型鹅品种,但其产蛋特点呈现季节性,有极强的就巢性,导致皖西白鹅产蛋量低下,因此消除就巢性可能是提高皖西白鹅繁殖性能的有效方式。家禽体内催乳素(prolactin,PRL)对于就巢发生和维持起关键作用。为此,本试验以休产期皖西白鹅为研究对象,实验室制备重组催乳素,颈部皮下注射主动免疫皖西白鹅,分析其体内繁殖激素相关水平以及对产蛋的影响。结果表明:1.构建得到pET32a-PRL载体,经IPTG诱导表达后,获得分子量约为44kD的重组催乳素(rPRL),蛋白表达量为262.5µg/ml,rPRL蛋白占约

4、总蛋白的35.2%(±1.88%),His-tag柱回收率约为64.9%。2、两次免疫后实验组激素水平变化:PRL、FSH、VIP水平总体呈升高趋势,GnRH、ß-EP水平总体呈先降低再升高的趋势,LH总体呈降低趋势。PRL水平:两次免疫后,各组PRL含量均有所升高,两次免疫各组间PRL水平无A显著性差异。FSH水平:首次免疫,组Ⅰ(23.42±2.80ng/ml)与阴性对照、阳性对AB照相比升高极显著(p<0.01),组Ⅱ(19.81±10.8ng/ml)比阴性对照、阳性对照组极显著升高(p<0.01);二次免疫后各组血清中FSH含量均有所上升,各组间含量无显著性差

5、异。GnRH水平:首次免疫,组Ⅰ升高,其他四组均有所下降,二次免疫,各组含量均有所升高,各组间含量无显著性差异。LH水平:首次免疫后,各组血清中含量有所降低,二次免疫后,组Ⅱ含量升高,其他四组均降低,各组间无显著性差A异。VIP水平:首次免疫后,组Ⅰ(128.3±73.8pg/ml)与阳性对照组相比极显著升高(p<0.01)。二次免疫后,组Ⅲ水平降低,其他四组均有所升高,各组间无显著性变A化。ß-EP水平:首次免疫后,组Ⅰ(355.3±241ng/L)与其他四组相比升高极显著(p<0.01),其他四组含量均下降,二次免疫后,各组血清中有所升高且各组间水平无显著性差异3

6、.重组PRL蛋白主动免疫可降低皖西白鹅就巢率,产蛋量无显著性变化。关键词:皖西白鹅,就巢,重组催乳素,主动免疫IAbstractAsafinemid-bodiedspecies,WanxiWhitegoosehasthecharactersofseasonalegglayingandhighbroodiness,itstronglyinhibititseggproduction.SoitprobablybethemosteffectivewaytoimprovereproductionofWanxiWhitegoosethrouhteliminatebloodness

7、.PRLplaysagreatroleinbloodnessoccuringandkeepinginavianspecies.Forthispurpose,Wanxi-Whitegoosewaschoosedtoberesearchedobjectinthisexperiment.RPRLispreparedinlaboratoryandWanxi-Whitegoosewasactivelyimmunizatiedthroughnecksubcutaneousinjection.Finally,theresultswereanalyzedthatth

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