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1、万方数据中国生态农重学报2010年5月第18卷第3期ChineseJournalofEco-Agriculture,May2010.18(3):535-541DoI:lO.3724,SP.J.1011.2010.00535水稻多逆境响应基因OsMsr8的克隆与表达木黄梅1,2崔延春1,2朱玉兴1王曼玲1夏新界p。(1.中国科学院亚热带农业生态研究所长沙410125;2.中国科学院研究生院北京100049)摘要非生物胁迫是引起全世界作物减产的主要因素,利用分子生物学技术提高作物耐逆性已成为作物改良的新途径。本课题组采用Affymetrix
2、水稻表达芯片分析了超级稻亲本。培矮64S”全基因组表达模式,发现了众多逆境相关基因。OsMsr8基因受低温、干旱等多逆境因子诱导,在孕穗期干旱胁迫下表达水平显著上调。qRT-PCR分析试验数据与芯片结果基本吻合。利用生物信息学方法对所获得序列进行开放阅读框、序列同源性分析,预测了编码蛋白质产物的理化性质。该基因ORF全长为834bp,编码277个氨基酸残基,不舍内含子。无典型的基因保守结构域。在不同物种中有高相似性的蛋白,功能未知。对启动子区域进行分析,发现含有多种与逆境诱导相关的调控元件,推测该基因与植物耐逆性有一定关系.关键词水稻逆
3、境基因芯片实时定量PeR基因克隆中图分类号:Q344+.13文献标识码:A文章编号:1671.3990(2010)03.0535.07Cloningandexpressionofmulti-stressresponsivegene(OsMsr8)inriceHUANGMeil‘2,CUIYan.Chunl‘2,ZHUYu.Xin91,WANGMan—Lin91,XIAXin—Jiel(1.InstituteofSubtropicalAgriculture,ChineseAcademyofSciences,Changsha410125,C
4、hina;2.GraduateUniversityofChineseAcademyofSciences,Beijing100049,China)AbstractAbioticstressesconstituteaseriousthreattoagriculturalproduction,whichoftendevelopsintomajorcropproduction-reducingfactorsaroundtheworld.Molecularbiologytechnologyhas.however,emerged私apromisin
5、gvehicleimprovingcroptolerance.UsingGeneChipRiceGenomeArray(Affymetrix)toanalyzeglobalgenomeexpressionprofilingofparentsuperrice“Pei’ai64S”.weidentifiedalargenumberofstressresponsivegenes.OsMsr8,whichrespondstodroughtandcoldstresses,ishighlyinducedinricepanicle.Quantitat
6、ivereal·timePCR(qRT-PCR)dataarewellinsyncwithmicro-arrayresults.Bio-informaticmethodswereappliedtOanalyzethegenesequenceanditsproteinproduction,includingORF,homologoussequences,andphysicalandchemicalproperties.Theresultsshowthegenewitha834bpopenreadingfianleandencoding27
7、7aminoacids.OsMsr8genelacksintronandtypicalconserveddomainsinitsproteins.Alsounknownhomologousproteinsexistinthedifferentspecies.Analysisofputativepromoterregionidentifiesseveralregulatoryelementsrelatedtostressresponse.OsMsr8mightthereforebemuchrelatedtoricestresstolera
8、nce.KeywordsOryzasativaL.,Stress,GeneChip,Real—timePCR,Genecloning(ReceivedAug.1l,2009;acceptedNov.13,2
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