离子束介导遗传转化小麦突变体的遗传分析

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1、河南农业科学离子束介导遗传转化小麦突变体的遗传分析111231王铁固,杨天佑,赵新亮,冯伟森,黄群策,陈士林(1.河南科技学院生命科技学院,河南新乡453003;2.洛阳市农业科学院,河南洛阳471022;3.郑州大学河南省离子束生物工程重点实验室,河南郑州450052)摘要:以离子束介导后代的9个小麦突变体和4个受体作供试材料,对其进行了RAPD和SSR分子标记,在此基础上获得了矮秆突变株系1042的2个特异片断,并进行了测序和同源序列分析。13个材料间分子标记遗传差异比较结果表明,离子束介导遗传转化后的突变明显小于小麦品种间的遗传差

2、异。矮秆突变株系1042的SSR标记特异片断序列BLAST分析结果表明,从1042中扩增到的特异片断与小麦高秆基因RhtD1a中的部分序列高度一致,1042的株高明显降低可能是由于该株系遗传突变,产生了2个矮秆基因所致;该特异片断与小麦BAC克隆中LTRretrotransposonAngela3s转座子的部分片断同源性最高,说明离子束介导遗传转化诱发变异可能与小麦基因组中反转录转座子的激活有关。关键词:小麦;离子束;遗传转化;RAPD;SSR;序列分析中图分类号:S512.1文献标识码:A文章编号:10043268(

3、2010)05001105GeneticAnalysisofWheatMutantsbyIonBeammediatedTransformation1112WANGTiegu,YANGTianyou,ZHAOXinliang,FENGWeisen,31HUANGQunce,CHENShilin(1.SchoolofLifeScienceandTechnology,HenanInstituteofScienceandTechnology,Xinxiang,453003,China;2.AgriculturalScience

4、InstituteofLuoyang,Luoyang471022,China;3.HenanProvincialKeyLaboratoryofIonBeamBioengineering,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)Abstract:Ninewheatmutantsfromgenetictransformationmediatedbyionbeamandtheir4recipientvarietiesweretakenastestmaterialstoconductRAPDand

5、SSRmarkeranalysis,andthen2specialfragmentsfromthedwarfmutant1042weresequenced,homologyanalysisofwhichwasdone.Theresultsshowedthatthevarianceofmutantsfromgenetictransformationbytionbeamwassmallerthanthegeneticvariancebetweendifferentrecipientvarieties.AfterBLASTanalysis,

6、thespecialfragmentsofSSRmarkerfromthedwarfmutant1042werehighlyidenticaltopartialsequenceofhighstrawgeneRhtD1a,suggestingthatthedwarfingmightbecausedbythetwomutationdwarfgenes;whilethespecialfragmentsofRAPDmarkerhadhighhomologywithpartialsequenceofLTRretrotransposonAng

7、ela3sinwheatBACclones,whichsuggestedthatthemechanismofmutagenesisbyionbeamispartiallyattributedtothereactivationoftheretrotransposons.Keywords:Wheat;Ionbeam;Genetictransformation;RAPD;SSR;SequenceanalysisRAPD是以基因组DNA为模板,以一个随机PCR扩增反应产生不连续的DNA产物,用以检测[1]的寡核苷酸序列(通常为10个碱基

8、对)作引物,通过DNA序列的多态性。目前该方法已广泛用于种收稿日期:20091012基金项目:农业部农业公益性行业科研专项经费项目(200803034)作者简介:王铁固(1971),男,河南伊川人,博

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