重组人内皮抑素对鼻咽癌细胞cne2增殖及凋亡的影响new

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1、第18卷第5期中国耳鼻咽喉颅底外科杂志Vol．18No．52012年10月ChineseJournalofOtorhinolaryngology－SkullBaseSurgeryOct．2012·基础研究·重组人内皮抑素对鼻咽癌细胞CNE2增殖及凋亡的影响12133113马静，王小燕，张铁松，杨洁，任艳鑫，林垦，李正才，李晓江(1．昆明市儿童医院耳鼻咽喉科，云南昆明650034;2．咸阳市中心医院耳鼻咽喉科，陕西咸阳712000;3．云南省肿瘤医院头颈外科，云南昆明650118)摘要:目的探讨重组人内皮抑素(rh-endostatin，rh-ES)对鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡

2、的影响。方法分别以25、50、100、200、400μg/ml的rh-ES体外处理人鼻咽癌细胞株CNE2，同时设空白对照组和细胞对照组。利用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测不同浓度和时间rh-ES作用下的细胞增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;透射电镜观察CNE2细胞超微结构的变化。结果①MTT检测显示rh-ES(25～400μg/ml)能抑制CNE2细胞的增殖，不同浓度的rh-ES对人鼻咽癌细胞株CNE2具有不同程度的生长抑制作用，且存在时间剂量效应，以400μg/mlrh-ES作用72h后抑制效果最为显著，各浓度组相比差异具有统计学意义。②流式细胞仪检测结果发现与CNE2

3、细胞对照组相比，rh-ES实验组处于细胞周期G0/G1期的细胞明显增多，细胞凋亡率增加(P＜0．05)。③电镜观察，rh-ES实验组CNE2细胞出现凋亡特征，细胞和细胞器皱缩，核染色质边集碎裂，核膜消失。结论rh-ES能显著抑制鼻咽癌细胞CNE2细胞的增殖，并具有时间-剂量依赖性，其主要机制可能为诱导细胞凋亡，调整细胞周期分布。关键词:重组人内皮抑素;鼻咽癌;增殖;凋亡中图分类号:R739．63文献标识码:A文章编号:1007－1520(2012)05－0345－05Effectofrh-endostatinonproliferationandapoptosisofnasoph

4、aryngealcarcinomacellCNE2MAJing，WANGXiao-yan，ZHANGTie-song，etal．(DepartmentofOtolaryngology，KunmingChildren’sHospital，Kunming650034，China)Abstract:ObjectiveToevaluatetheinhibitoryeffectandthepossiblemechanismofrh-endostatin(rh-ES)onnasopharyngealcarcinomacells(CNE2)．MethodsCNE2cellsweretreat

5、edwithrh-ESofdifferentconcentrations(25，50，100，200and400μg/ml，respectively)invitro．Methylthiazolyltetrazolium(MTT)assaywasusedfordetectingthecellproliferationinrh-EStreatmentatdifferentconcentrationsanddifferenttimeintervals．Flowcytometrywasusedfordetectingtheeffectofrh-ESoncellcycleandapopt

6、osis．TransmissionelectronmicroscopewasusedforobservingthecellularmorphologyofCNE2cells．Results①MTTdetectionshowedthatrh-ESsignificantlyinhibitedthegrowthofnasopharyngealcarcinomacellCNE2inbothtime-anddose-dependentmanners．72hoursafterrh-EStreatmentitwasat400μg/ml，andtheinhibitoryratewas41．89

7、%，whichwashigherthanthoseoftheothergroups．②FlowcytometryshowedthattheproportionofCNE2cellsarrestedinG0/G1phaseandcellapoptosisrateafterrh-EStreatmentweresignificantlyhigherthanthoseofthecontrolgrouprespectively(P＜0．05)．③Transmissionelectronmicrosco