生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响论文

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1、生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响论文黄子健陈颖梅雪婷何丽娟喻玫【摘要】目的研究生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖和凋亡的作用。方法将奥曲肽（浓度分别为1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg·L-1）作用于卵巢癌细胞，用MTT法检测细胞活性，同时通过碘化丙啶（PI）染色，采用流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果奥曲肽对SK-OV-3细胞的增殖抑制效应具有剂量依赖性特点，并能诱导SK-OV-3细胞凋亡。结论奥曲肽对SK-OV-3细胞增殖具有重要调控作用，生长抑素类似物可促进卵巢癌细胞凋亡。【关键词】生长抑素类似物卵巢癌细胞奥曲肽细胞凋亡【A

2、bstract】Abjective：Toexploretheeffectofsomatostatinoctreotideonproliferationandapoptosisofovariancancercell.Methods：SK-OV-3cellsg·L-1respectively）.TheeffectsofoctreotideonprolifierationofSK-OV-3cellsetry.Results：OctreotideinhibitedtheproliferationofSK-OV-3cellsindose-dependentmanners，andinducedc

3、ellapoptosis.Conclusions：SomatostatinreceptorplaysanimportantroleinregulatingproliferationofSK-OV-3cells，andsomatostatincaninducecellapoptosis.【KeyatostatinanalogueOvariancancercellOctreotideApoptosis化疗已成为治疗卵巢癌的主要方法.freelg/1ml/支，进口药品注册证号：H20030555，诺华制药生产，批号：50076；四甲基偶氮唑盐（MTT），购自sigma公司；碘化丙啶（PI）

4、，购自上海华舜生物工程有限公司。1.2细胞株及培养人卵巢癌细胞株SK-OV-3购自中国科学院肿瘤研究所。于37℃、5%CO2饱和湿度培养，培养基为含10%胎牛血清（HycloneLaboratoreisInc.提供，优等，批号：AMC15818）的DMEM（InvitrogenCo.提供，批号：1290007），0.25%胰蛋白酶（上海华美生物公司）消化传代。1.3MTT法检测细胞活性将浓度为5×104个/ml卵巢癌细胞SK-OV-3，接种于96孔平底培养板中，每孔100μl，培养24h后，再分别设空白对照组和不同浓度药物组（1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg

5、·L-1），每组设3个复孔。置37℃，体积分数为5％CO2培养24h，于结束前4小时加入MTT20μl/孔，4h后弃上清液，加入二甲基亚砜（DMSO）100μl/孔，振荡10min左右，置酶标仪测定OD值，波长为450nm。按下列公式计算细胞抑制率，评价药物对卵巢癌细胞增殖的抑制作用。细胞抑制率（%）=（正常对照组平均OD值-实验组平均OD值）/正常对照组平均OD值×100%1.4PI染色法检测细胞凋亡收集经1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg·L-1奥曲肽处理24h的SK-OV-3细胞，经0.25%胰蛋白酶消化5min，1500rpm离心3min，收集细胞于1

6、.5mlEP管中，用PBS洗3次后3500rpm离心5min；再用200μlPBS重悬细胞，边涡漩振荡边滴加70%预冷4℃乙醇，共加1ml，振荡均匀后于4℃过夜。3500rpm离心5min，弃固定液。每个样品用500μlPBS重悬细胞，3500rpm离心5min，洗涤2次。弃上清液，用200μlPBS重悬细胞，吹打均匀，每个样品加800μlPI染液，4℃染色30min。最后，用400目尼龙网将细胞悬液过滤至流式细胞管中，上机检测，用CELLQUEST软件分析实验结果。1.5统计学分析实验数据以x±s表示，结果经MircrosoftExcel2000进行统计学处理，并进行TTEST分析

7、，t值法比较组间差异的显著性。2结果2.1奥曲肽对SK-OV-3细胞增殖的抑制效应MTT实验结果显示，奥曲肽对SK-OV-3细胞增殖的抑制作用具有剂量相关的特点，当奥曲肽浓度≥12.5mg·L-1时，对SK-OV-3细胞增殖的抑制效应明显。2.2奥曲肽对SK-OV-3细胞形态投射电镜观察结果镜下可见SK-OV-3细胞的核更大，细胞呈现椭圆形，核仁多个且清晰，核内染色质均匀，线粒体多呈现长条形，内峭排列规则清晰。奥曲肽50mg/L处理24h后，可见大量有膜空