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1、第13卷第3期 中国水产科学Vol.13No.32006年5月JournalofFisherySciencesofChinaMay20064种紫菜叶状体的ISSR分子标记分析122231崔灵英,许 璞,朱建一,许广平,骆其君,马家海(11上海水产大学生命科学与技术学院,上海200090;21江苏省海洋水产研究所,江苏南通226007;31宁波大学生命科学学院,浙江宁波315211)摘要:4种紫菜样品分别为采自青岛海区的野生条斑紫菜(Porphyrayezoensis)、华北半叶紫菜(P1katadaivar1hemi2phylla)、
2、少精紫菜(P1oligospermatangia)和浙江象山海区人工栽培的坛紫菜(P1haitanensis)。取其10～15cm叶状体为材料,采用ISSR(Inter2simplesequencerepeats)分子标记进行分析。从100个ISSR引物中筛选出22个引物,扩增出清晰、可重复的条带共计247条,其中多态性条带比例达9515%。根据扩增结果进行的聚类分析显示,条斑紫菜和少精紫菜的亲缘关系最为接近,在聚类图中二者首先聚在一起,接着与坛紫菜相聚,最后与华北半叶紫菜汇聚。本研究还讨论了紫菜属海藻的遗传多样性以及种间的特异性ISSR分子
3、标记。本研究目的在于为紫菜遗传变异、亲缘关系以及分类研究、探索新的分析手段。[中国水产科学,2006,13(3):371-377]关键词:紫菜;ISSR2PCR;聚类分析中图分类号:Q943文献标识码:A文章编号:1005-8737-(2006)03-0371-07 紫菜(Porphyra)是重要经济海藻,广泛分布于的限制性酶切位点,对15种紫菜进行了种质鉴定和[11]从寒带到亚热带之间的潮间带海域。已报道的紫菜系统学研究;Mizukami等利用RAPD技术对条种类约有134种之多,中国记载有22个物种或变斑紫菜(P.yezoensis)的
4、4个品种和甘紫菜(P1ten2[1]种。紫菜生活史属不等世代型,分为大型配子体era)的2个品种进行了种质差异分析。Dutcher[12](叶状体)世代和微型孢子体(丝状体)世代。紫菜分等用RAPD标记研究北大西洋西部海区和临近类学研究主要以叶状体形态特征为依据,如根据叶墨西哥湾海区的3种紫菜的遗传多样性。Stiller[13]片的颜色、形态、厚度、边缘细胞特征、藻株性别特等对紫菜(P1rediviva)的rDNA进行RFLP研征、生殖细胞分裂式、染色体数目以及生活史类型等究,揭示了东北太平洋沼泽地带这一新种可能源于[2-5][14]进行分类
5、与谱系分析。然而紫菜的表型特征北大西洋的紫菜(P1purpurea)。Osamu等对条有一定的局限性,有些表型特征是基因型与环境相斑紫菜(P1yezoensis)的3个品系进行了AFLP分互作用的产物,基因型相同的个体在不同环境条件析,表明这些品系的遗传背景的多样性程度很高。[15]下可能表现出显著的表型差异,这给紫菜分类和系郭宝太等对条斑紫菜和坛紫菜(P1haitamensis)[6-9]统学研究带来一定的困难或不确定性。的总DNA酶切后进行直观RFLP分析,发现2种紫核酸DNA是最原始的遗传物质。随着现代分菜的谱带表现出明显的种间差异。子
6、生物学技术的发展,直接以DNA为分析对象进作为紫菜属海藻的二倍体世代,其丝状体具有[10]行PCR扩增的各种分子标记技术不断涌现出来,可易于长期保存的特点,常被用作于种质保存的材从核酸水平检测个体、群体和种间的遗传差异。分料。近年来,一些以丝状体为材料开展的研究,如利子标记具有信息量大和不受环境影响等诸多优点,用RAPD技术对多种紫菜丝状体进行遗传多样性[16-18]可以弥补传统分类学方法的不足,为系统分类学提和种质鉴定研究,通过RAPD标记测序转换[19]供了新的研究方法。各种分子标记技术在紫菜研究得到SCAR的标记,利用AFLP对坛紫菜的
7、遗传[10][20]中也得到了广泛应用。Stiller等根据SSUrDNA变异进行的研究等,丰富了紫菜分子标记研究的收稿日期:2005-07-19;修订日期:2005-11-15.基金项目:农业部“渔业资源保护”项目资助(农财发[2004]50).作者简介:崔灵英(1979-),女,硕士研究生,从事海洋生物学研究.E2mail:lycui@stmail.shfu.edu.cn通讯作者:许 璞.Tel:0513-85228263;E2mail:xupu66@sina.com372中国水产科学第13卷内容与方法。但从紫菜两个世代的细胞性质来看,学
8、方面的数据资料,为紫菜遗传变异、亲缘关系以及叶状体的单倍体性质使结果更为直观。分类研究提供新的方法。ISSR分子标记是用SSR(Simplesequencerepe
