瘦素在缺氧预处理骨髓间充质干细胞保护心肌中的重要作用

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1、瘦素在缺氧预处理骨髓间充质干细胞保护心肌中的重要作用论文作者签名：妞陟。指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：委员6：施育平主任医师浙江大学医学院附属第二医院张召才副主任医师浙江大学医学院附属第二医院陈铁龙副主任医师杭州市中医院黄进宇主任医师杭州市第一人民医院浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学或其他教

2、育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：乏句锡签字日期：ob?多年厂月、_>Et学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：枷嘞签字日期：p钿)年丁月7了日导师签名：签字日期：汐拥?年』．El衫曰澎江大

3、学硕士学位论文致谢致谢岁月如梭，转眼间，两年多的研究生求学生活即将结束，站在毕业的门槛上，回首往昔，奋斗和辛劳成为丝丝的记忆，甜美与欢笑也都尘埃落定。值此毕业之际，我谨向所有关心和帮助过我的老师和朋友表达我最真挚的谢意和美好的祝福。首先，我要衷心感谢我的导师王建安教授。在硕士学>--j阶段，王老师为我提供了优越的科研和学>--j环境，并在生活上给予了我无微不至的关怀。他严谨的治学精神、深厚广博的学术造诣及孜孜不倦的开拓进取精神都深深感染着我。正是在王老师的悉心指导和大力支持下我的硕士学>--j和科研课题才得以顺利完成。衷心感谢浙二医院心血管内科胡新央老师。在

4、课题研究近两年的时间中，胡老师帮助我完成了论文选题，培养了我的实验技术，在我遇到困难的时候为我提供了大量的帮助使我渡过难关。衷心感谢浙二医院临床研究中心张行老师、曹江老师及全体研究人员在科研和生活中对我的关心和帮助。感谢蒋智、徐银川、陈会强、吴蓉蓉、陈攀攀、周瑜、王侃、张娜、等师兄师姐，师弟师妹的热心帮助和支持。我还要感谢我的父母及我的女朋友，感谢你们一直以来默默的付出，你们给我的爱和支持是我不断努力的动力。同时我也要感谢我的室友宋刘广、吴加华、胡科跃。我们在生活中互相包容、互相帮助和鼓励，共同经历了许多快乐美好的时光，收获了一份难得的友谊。最后，也感谢百忙

5、之中抽出时间审阅论文和参加论文答辩的各位专家和教授，感谢你们提出的宝贵意见!浙江大学硕士学位论文中文摘要瘦素在缺氧预处理骨髓间充质干细胞保护心肌中的重要作用浙江大学医学院硕士研究生导师内科学(心血管)王力涵王建安教授中文摘要背景：在全球范围内，心血管疾病在人群中的发病率以及造成的死亡率都处于领先地位，而冠心病心肌梗死是心血管死亡的主要原因。大量的研究证明细胞移植疗法能改善心肌梗死后心功能，近几年已经成为了心血管领域研究的热点。骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells，MSCs)是具有多分化方向能力的成体干细胞，因其能够在体外大量扩增，进行自

6、体移植无排异及来源的限制，也不涉及伦理问题，在细胞移植治疗中具有独到之处。大量研究显示，间充质干细胞经O．5％氧浓度缺氧预处理24h后，其移植治疗心肌梗死的效果大大提高。然而目前仍然不清楚为何缺氧预处理能提高间充质干细胞的保护作用。故此，我们在此探讨了是何种机制引起了该种效应。方法：我们利用全骨髓贴壁的方法分离骨髓间充质干细胞(MSCs)，按照常氧与缺氧进行预处理并比较两者之间的差别(常氧：[21％02，5％C02]，缺氧：[0．5％02，5％C021)。我们利用实时荧光定量PCR(RT．PCR)、双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测MSCs基因及蛋白

7、水平瘦素(1eptin)表达。在体外，我们利用共培养的方法观察骨髓间充质干细胞对心肌细胞的保护作用并利用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率。在体内，我们同样利用TUNEL染色法检测移植细胞3天后梗死区与梗死周边区心肌凋亡率。移植细胞28天后我们利用小动物心超及血流动力学检测法检测小鼠心功能并利用Masson’S染色法检测梗死面积。II浙江大学硕士学位论文中文摘要结果：目前的研究表明，间充质干细胞能通过旁分泌的作用分泌多种细胞因子起到保护心肌的作用，leptin是其中重要的一员。大量研究证明leptin能直接抑制心肌细胞凋亡并且能促进血管新生增强缺血心肌血供。

8、1．前期研究中我们通过基因芯片筛查发现，相较于正常培