苗药头花蓼对hp感染小鼠th1th2型细胞因子表达水平的影响

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1、贵阳医学院2013届硕士研究生论文《中国图书资料分类法》单位代码：10660分类号：R378学号：S100084贵阳医学院2013届硕士学位论文苗药头花蓼对Hp感染小鼠Th1/Th2型细胞因子表达水平的影响研究生：张然导师：罗昭逊副教授莫非教授年级：2010级专业：临床检验诊断学2013年5月12日贵阳医学院2013届硕士研究生论文目录摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„1前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„3材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„5结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„22讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„35参考文

2、献„„„„„„„„„„„„„„„„„42英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„46略缩词表„„„„„„„„„„„„„„„„„50论文原创性声明„„„„„„„„„„„„„„51附：综述„„„„„„„„„„„„„„„„52贵阳医学院2013届硕士研究生论文苗药头花蓼对Hp感染小鼠Th1/Th2型细胞因子表达水平的影响专业名称：临床检验诊断学研究生：张然导师：罗昭逊副教授莫非教授摘要目的：观察苗药头花蓼对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)相关性胃炎小鼠模型的治疗效果，研究体内、外头花蓼对小鼠辅助性T细胞Ⅰ型（HelperTcells，

3、Th1）与Ⅱ型（HelperTcells，Th2）细胞因子的影响，探讨头花蓼治疗Hp相关性胃炎时所发挥的免疫调节机制，为临床治疗Hp相关性胃炎及新药的研发提供实验依据。方法：采用琼脂稀释法检测头花蓼对Hp小鼠适应株SS2000的最低抑菌浓度(Minimalinhibitoryconcentrations，MIC)。分离小鼠脾脏淋巴细胞，与不同浓度头花蓼（1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL、32μg/mL、64μg/mL、128μg/mL、256μg/mL、512μg/mL、1024μg/mL）共同培养，以0μg/mL为

4、对照，采用CCK-8细胞活性检测试剂盒（CellCountingKit-8，CCK-8)检测头花蓼对淋巴细胞的体外增殖情况，用ELISA方法检测不同浓度头花蓼对体外培养淋巴细胞活化、分化过程中Thl及Th2型细胞因子细胞因子γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ）和白介素4（interleukin-4，IL-4）水平的影响。采用灌胃接种法复制Hp感染C57BL/6小鼠的Hp相关性胃炎模型，同时设空白对照，模型复制成功后，将模型组小鼠分为头花蓼及头花蓼联合阿莫西林的高、中、低浓度组，模型对照组和药物对照组(阿莫西林、克拉霉素和奥美拉唑三联药物)，各

5、组以相应药物连续灌胃治疗14d，空白对照组和模型组以无菌生理盐水治疗，停药后第28d用ELISA方法检测各组小鼠血清IFN-γ和IL-4含量，取胃粘膜组织做组织病理学检查、Hp培养以及荧光定量检测胃粘膜IFN-γ和IL-4mRNA转录水平变化。结果：1.苗药头花蓼对SS2000的MIC为4mg/mL，其对Hp的抗菌作用与药物浓度成正比。2．体外淋巴细胞培养：头花蓼在＜128μg/mL时，体外对小鼠脾脏淋巴细胞增殖没有明显的影响，≥128μg/mL浓度时，淋巴细胞数量开始明显减少。头花蓼＜64μg/mL浓度作用于经刀豆蛋白A(ConcaoavahnA，Co

6、nA)活-1-贵阳医学院2013届硕士研究生论文化的淋巴细胞72h后可提高IFN-γ的分泌，并呈剂量依赖性；头花蓼8－128μg/mL浓度范围内具有刺激淋巴细胞分泌IL-4的作用。3.小鼠感染Hp第8周，7模型组小鼠胃粘膜Hp定量培养可达10CFUHp/g，胃粘膜组织炎症评分可达2.588+0.463，Hp相关性胃炎动物模型复制成功。4.三联药物组和头花蓼高剂量组治疗Hp感染小鼠后炎症程度显著降低，炎症评分分别为1.356+0.316和1.725+0.33，与模型组小鼠比较有显著性意义（P＜0.05），头花蓼中、低剂量组和头花蓼联合阿莫西林各剂量组小鼠胃

7、粘膜炎症程度与模型组没有明显差异。5.与空白组小鼠比较，模型组小鼠血清IFN-γ显著增高，三联组和头花蓼高剂量组小鼠IFN-γ明显降低，有显著性差异(P＜0.05)；中西药联合各个剂量组没有明显变化。Hp感染后及各治疗组小鼠血清IL-4没有显著性变化。6.Hp感染小鼠胃粘膜IFN-γ转录水平上调9倍，IL-4转录水平下调7.7倍。头花蓼高中剂量组和三联组小鼠胃粘膜IFN-γmRNA的转录水平分别下调6.7倍、3.7倍和6.3倍，与模型组比较有显著性差异（P＜0.05）。与模型组比较，三联组和头花蓼高剂量组小鼠胃粘膜IL-4转录水平分别上调4倍和4.8倍，

8、中剂量组和低剂量组也显著上调，与模型组比较有统计学意义（P＜0.05）。结论：1