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时间:2019-03-06
《苗药头花蓼对幽门螺杆菌感染小鼠g、d细胞的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、贵阳医学院2013届硕士研究生论文《中国图书资料分类法》分类号:R378单位代码:10660学号:S100083贵阳医学院2013届硕士学位论文苗药头花蓼对幽门螺杆菌感染小鼠G、D细胞的影响研究生:孙朝琴导师:莫非教授年级:2010级专业:临床检验诊断学2013年5月7日贵阳医学院2013届硕士研究生论文目录摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„2前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„4材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„7结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„21讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„40结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„47参考文献„„„„„„„„„„„
2、„„„„„„48致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„56略缩词表„„„„„„„„„„„„„„„„„57论文原创性声明„„„„„„„„„„„„„„58附:综述„„„„„„„„„„„„„„„„59-1-贵阳医学院2013届硕士研究生论文苗药头花蓼对幽门螺杆菌感染小鼠G、D细胞的影响专业:临床检验诊断学研究生:孙朝琴导师:莫非教授摘要目的:建立幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)SS2000(Sydneystrain2000)感染C57BL/6小鼠动物模型,比较苗药头花蓼各剂量组以及与阿莫西林联用时对Hp慢性胃炎小鼠胃粘膜的Hp清除作用和修复保护作用,通过研究头花蓼对Hp感染
3、小鼠胃粘膜内分泌细胞G、D细胞和GASmRAN、SSmRNA的影响,探讨头花蓼保护修复Hp所致的胃粘膜损伤的作用机理,为临床治疗Hp慢性胃炎及新药的研发提供实验依据。方法:(1)琼脂稀释法检测苗药头花蓼对Hp悉尼株SS2000的最低抑菌浓度(Minimalinhibitoryconcentration,MIC)。(2)将110只无特定病原体(specificpathogenfreeSPF)级C57BL/6小鼠随机分为模型组(90只)和空白组(20只),造模组以每只小鼠0.5mLHpSS2000菌液进行灌胃处理,间隔1d,共5次,空白组小鼠灌胃等量无菌脑心浸液肉汤,末次菌液灌胃8w后处死空白组和
4、造模组各10只小鼠,观察Hp感染小鼠模型是否构建成功。(3)成功建模后将造模组小鼠随机分为8组(10只/组),分别进行高、中、低剂量的头花蓼和高、中、低剂量头花蓼联合阿莫西林(作为中西结合高、中、低剂量组)及三联药物和生理盐水(模型组)灌胃治疗,每天灌胃1次,连续2w,停药4w后处死所有组小鼠,用胃粘膜快速尿素酶试验、细菌微需氧培养和Giemsa染色评定各组药物对Hp的清除效果;HE染色判断药物对胃粘膜是否有保护修复作用;胃粘膜免疫组织化学染色和图像分析软件(Image-Pro-Plus,IPP)检测治疗前后胃粘膜G细胞、胃泌素(Gastrin,GAS)灰度值和D细胞、生长抑素(Somatos
5、tatin,SS)灰度值的变化,提取胃粘膜组织的RNA,采用实时荧光定量PCR(real-timefluorescencequantificationpolymerasechainreaction,real-timePCR)分析给药前后GAS、SSmRNA的表达差异。结果:(1)苗药头花蓼对HpSS2000的体外抑菌活性MIC=4mg/mL;(2)接种-2-贵阳医学院2013届硕士研究生论文Hp后8w,模型组小鼠胃胃粘膜Hp定植率为100%,HE染色结果显示模型组小鼠胃粘膜均呈现慢性炎症改变,证实Hp感染小鼠慢性胃炎的动物模型构建成功。(3)治疗后小鼠胃粘膜幽门螺杆菌定植密度降低,其中中西结合
6、高、中剂量组对Hp的清除作用明显,与模型组比较有显著意义(P<0.05),三联组可根除Hp;治疗后胃粘膜的炎症浸润程度减轻,头花蓼高剂量组和三联组胃粘膜炎症改善效果明显,与模型组比较,均具有统计学意义(P<0.05)。(4)Hp感染后小鼠胃粘膜的G细胞和GAS灰度值明显增多(P<0.05),GASmRNA表达显著上调(P<0.05),D细胞和SS灰度值轻度增加,SSmRNA表达上调明显(P<0.05)。治疗后,头花蓼高、中剂量组和中西药结合高、中剂量组G细胞和GAS灰度值降低明显,GASmRNA下调显著,与模型组比较,有统计学意义(P<0.05)。头花蓼组和中西结合高、中剂量组及三联组治疗后,
7、D细胞与SS灰度值下降不明显,SSmRNA下调显著(P<0.05);中西结合低剂量组D细胞及SS灰度值明显降低(P<0.05)。结论:1.头花蓼对HpSS200具有较好的抑菌活性,MIC为4mg/mL。2.Hp感染可导致胃粘膜受损,刺激G细胞分泌GAS,上调胃粘膜GASmRNA的表达;反馈调节D细胞分泌SS轻度增加,SSmRNA表达上调。3.头花蓼对Hp感染小鼠胃粘膜有较好的保护和修复作用,其作用
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