自分泌乙酰胆碱对大鼠胸腺组织细胞增殖及分化的影响

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheEffectofNon--neuronalAcetylcholineonTheProliferationandDifferentiationofThymusCellsinRatsByMuShangTutor：ProfessorZhangQingyongTheSecondClinicalCollege，ZhengzhouUniversityMay,2013学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已

2、经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：舷1rj／一日期：20I弓年易月匆日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位

3、论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：毪上日期≤斟，年‘月6日摘要自分泌乙酰胆碱对大鼠胸腺组织细胞增殖及分化的影响研究生穆上导师张清勇教授郑州大学第二附属医院胸外科河南郑州450014背景与目的乙酰胆碱作为传统的神经递质被人们所熟知，近年来研究发现哺乳动物免疫细胞可表达包括蕈碱受体(M受体，MAChR)、烟碱样受体(N受体，NAC胍)、合成ACh所需的乙酰转移酶以及分解ACh的乙酰胆碱酯酶llj，同时F蛳i等也发现被PHA刺激过的大鼠胸腺细胞分泌ACh明显有所提高12J。其证明了在免疫系统中存在合

4、成分解ACh，并通过自分泌或旁分泌释放ACh作用于自身或周围细胞从而调节免疫系统功能的非神经源性胆碱能系统。但国内外对其在免疫机制中的作用认识不一，且多针对外周淋巴细胞进行研究，本实验旨在通过检测体外培养大鼠胸腺组织细胞的活力并分析其T细胞分化不同亚群所占比例，初步探讨非神经源性乙酰胆碱对中枢免疫系统的作用和作用途径。方法使用植物血凝素(PHA)刺激体外培养大鼠胸腺组织细胞，根据加入试剂分为A组(空白对照)、B组(阿托品)、C组(维库溴铵)及D组(阿托品+维库溴铵)，培养后CellCountingKit．8(CCK．8)法测细胞活性，流式细胞术分析T细胞亚群。采用单方差分析，

5、SNK．q法两两比较分析各组之间差异。结果摘要1．CCK．8法细胞活力分析：各组大鼠胸腺组织细胞在450nm处与空白组校对后OD值(见表1)，统计数据通过单向方差分析得：F=24．945，P=0．0000．05)，C组细胞活性明显高于A、B、D组(尸

6、=0．239>0．05，不能认为各处理组之间差异有统计学意义；CD3+CD8+细胞比例统计数据通过方差分析得：F=0．848，P--0．477>O．05，不能认为各处理组之间差异有统计学意义。CD3+CD4+细胞与CD3+CD8+细胞数量之比统计数据通过单因素方差分析得：F=I．475，P=0．238>0．05，不能认为各处理组之间差异有统计学意义。结论1．ACh能通过N受体降低大鼠胸腺组织细胞活力，对其增殖起抑制作用。2．ACh能通过M受体降低大鼠胸腺组织细胞活力，对其增殖起增强作用。3．在大鼠胸腺细胞被PHA激活的条件下，M、N受体均接受ACh作用时，细胞活力无明显影响。

7、4．ACh对大鼠胸腺细胞分化为CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞无明显影响，对其分化无明显倾向性。关键词非神经源性乙酰胆碱；胸腺细胞；细胞活力；细胞分化AbstractTheEffectofNon--neuronalAcetylcholineonTheProliferationandDifferentiationofThymusCellsinRatsPostgraduate：ShangMuTutor：ProfessorQingyongZhangDepartmentofThoracicSurger