脂肪干细胞来源的生长因子对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的影响

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1、分类号学号M201075466学校代码10487密级硕士学位论文脂肪干细胞来源的生长因子对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的影响学位申请人：赵佳佳学科专业：口腔临床医学指导教师：张汉东陈莉莉答辩日期：2013年5月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofmedicineTheeffectsofcytokinesinadiposestemcell-conditionedmediumonth

2、emigrationandproliferationofskinfibroblastsinvitroCandidate:ZhaoJiajiaMajor:OralclinicalmedicineSupervisor:Prof.ZhangHandongProf.ChenLiliHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430074,P.R.ChinaMay,2013独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成

3、果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印

4、或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月目录中文摘要2英文摘要4正文实验研究前言5实验材料6实验方法7实验结果13讨论与结论15附图18参考文献27文献综述31致谢38附录（攻读学位期间发表论文目录）39脂肪干细胞来源的生长因子对皮肤成纤维细胞迁移和增殖的影响华中科技大学同济医学院附属协和医院口腔科硕士研究生：赵佳佳指导老师：张汉东教授陈莉莉教授摘要背景：脂肪干细

5、胞条件培养液（adiposestemcell-conditionedmedium，ASC-CM）中富含各类脂肪干细胞（adiposestemcells，ASCs）来源的细胞因子。目前研究证实，ASC-CM可以促进皮肤创伤修复，皮肤成纤维细胞是一类几乎参与整个创伤修复过程的重要效应细胞，其迁移与增殖是创伤修复首要的关键环节。目的：研究ASC-CM中表皮生长因子（EGF），血小板源性生长因子（PDGF），血管内皮生长因子（VEGF），成纤维细胞生长因子（bFGF）在创伤愈合过程中对皮肤成纤维细胞迁移和增

6、殖的作用机制。方法：（1）采用蛋白芯片技术，检测ASC-CM中包括EGF、PDGF、VEGF以及bFGF在内的507种细胞因子的含量（信号值，SV）；（2）采用划痕实验和transwell小室迁移实验，在ASC-CM中分别加入0、1、10、20、50、100ng/ml浓度的EGF、PDGF、VEGF和bFGF，上述各因子的中和抗体，及上述单一因子诱导皮肤成纤维细胞迁移24h后，检测其迁移率；（3）采用CCK-8实验，诱导皮肤成纤维细胞增殖3d后，检测其增殖率，分组同上。结果：（1）ASC-CM中EG

7、F（SV=458.0）、PDGF（SV=363.5）、VEGF（SV=360.5）、以及bFGF（SV=389.5）信号值均大于300；（2）相较于单一因子，ASC-CM对成纤维细胞的迁移有明显的促进作用。其中，PDGF、VEGF和bFGF对细胞迁移的促进作用显著，且随着浓度的上升而增加，PDGF在50ng/ml时、VEGF在20ng/ml时、bFGF在20ng/ml时达到各自的平台期；在ASC-CM中分别加入PDGF、VEGF和bFGF的中和抗体后，促进作用可被明显抑制；（3）相较于单2一因子，A

8、SC-CM对成纤维细胞的增殖有明显的促进作用。其中，EGF和bFGF对细胞增殖的促进作用显著，且随着浓度的上升而增加，并分别在50ng/ml和20ng/ml时达到平台期；在ASC-CM中分别加入EGF和bFGF的中和抗体后，促进作用可被明显抑制。结论：相较于单一因子，ASC-CM可明显促进皮肤成纤维细胞的迁移和增殖，其中所含有的PDGF、VEGF和bFGF对细胞迁移促进作用非常明显，且具有浓度依赖性；EGF和bFGF对细胞增殖促进作用非常明显，且具有浓度依赖性。因此A