胚胎神经祖细胞的永生化及其特性鉴定与功能研究

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1、分类号：R型!重庆医科大学密级：博士学位论文论文题目胚胎神经祖细胞的永生化及其特性鉴定与功能研究作者姓名孔渝菡指导教师姓名(职称、单位名称)秦新月教授重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市渝中区袁家岗友谊路1号申请学位级别博士学科、专业名称神经病学论文答辩年月2013年5月2013年4月重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的

2、材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与t--资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。学位论文作者签名：71．—瓮兹日期：扫f了．4．17学位论文版权使用授权书本人完全了锯重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，并编入有关数据霹进

3、行检索，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。保密论文在解密后适用本授权书。论文作者签名：盈籀蒸指导籼签名：私f4日期：沙I7，弘．17目录英汉缩略语名词对照⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯．7论文正文：胚胎神经祖细胞的永生化及其特性鉴定与功能研究⋯⋯⋯⋯．12前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12第一部分：小鼠胚胎大脑神经千细胞的分离培养及永生化神经祖细胞的建立141材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142实验结果⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．193讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23第二部分：永生化胚鼠神经祖细胞的鉴定与分化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯251材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．443讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．60参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．65致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．83博士期间发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯84重庆医科大学博士研究生学位论文英文缩写AdB27bpbFGFBSACDcDNACIAPCNSC02Cy3DABDAPI英汉缩略语名词对照Adenovirus英文全称B27supplementBasepairBasicfibroblastgrowthfactorBovineserumalbuminCellsurfaceantigenComplementarydeoxynucleicacidCalfIntestineAlkalinePhosphataseCentralnervoussystemCarbondioxideCyanine

6、3Diaminobenzidine4’，6-diamidino-2-phenylindole中文全称腺病毒B27添加剂碱基对碱性成纤维细胞生长因子牛血清白蛋白细胞表面抗原互补脱氧核糖核酸小牛肠碱性磷酸酶中枢神经系统二氧化碳花青素3二氨基联苯胺4’，6．二脒基．2．苯基吲哚ddH20Distilled，deionizedwater蒸馏脱离子水D^倒EA僵DMSODNAdNTPDTTDulbecco改良的Eagle培Dulbecc。’sm。difiedEagle’smedium养基Dulbecco’SmodifiedEagle’Smedium／Du

7、lbecco改良的Eagle培Ham’SF一12NutrientMixture养基／HamF．12营养混合DimethylsulfoxideDeoxyrinucleicacidDeoxynucleosidestriphosphateDithiothreitol物二甲亚砜脱氧核糖核酸脱氧核苷三磷酸二硫苏糖醇重庆医科大学博士研究生学位论文E12．5／14EBEDTAEGFEPtubeFBSFCSFITC疑心GFPGlyFACShHBSSHEK293kbLBLipo^厦AP2mlUlmRNAMSCsM1TNBNSCsNSENPCsEmbryonic1

8、2．5／14daysEthidiumbromideEthylenediaminetetraaceticacidepidermalgrowthfacto