1株具芘降解功能酵母菌的分离鉴定及其特性研究

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1、１０１６６＠单位代码：硕士学位论文１株具芘降解功能酵母菌的分离鉴定及其特性研究论文作者：微生物学学科专业：指导教师：＾生命科学学院培养单位：全曰制培养类别：完成时间２０１８年０６月０３曰：沈阳师范大学学位评定委员会单位代码：10166硕士学位论文1株具芘降解功能酵母菌的分离鉴定及其特性研究论文作者：邓超学科专业：微生物学指导教师：卜宁培养单位：生命科学学院培养类别：全日制完成时间：2018年06月03日沈阳师范大学学位评定委员会学位论文独创性声明

2、本人所呈交的学位论文是在导师的指导下取得的研宄成果。据我所知，除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人己经发。表或撰写过的研究成果对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示了谢意。作者签名：对趙日期：学位论文使用授权声明本人授权沈阳师范大学研究生处，将本人硕士学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索；有权保留学位论文并向匿家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，允许论文被查阅和借阅、、；有权可以采用影印缩印或扫描等复制手段保存汇编

3、学位论文。保密的学位论文在解密后适用本规定。作者签名：日期：1株具芘降解功能酵母菌的分离鉴定及其特性研究摘要多环芳烃（Polycyclicaromatichydrocarbons，PAHs）是一类具有高生态毒性、高生物富集性的典型有机污染物，因其存在广泛且难以降解而成为环境中污染重、治理难、危害大的持久性污染源。由四个苯环构成的芘(Pyrene)是监测PAHs污染的标志物，是探究微生物降解PAHs的模型分子。已有的研究表明，土著微生物对PAHs污染土壤的修复能力明显高于其他微生物，其对所在环境有很强的

4、适应性，竞争优势明显。本研究以长期受石油污染（主要含多环芳烃）的沈抚污灌渠底泥为菌源，分离并筛选土著的芘降解功能菌，研究其特性，探究菌株对芘污染土壤的降解机制，旨在为PAHs（芘）土壤污染的控制和生物修复提供一定的科学依据。主要研究结果如下：1.从长期受累于石油污染的沈抚污灌渠底泥中分离出以芘为唯一碳源的多环芳烃降解菌，经进一步筛选得到芘降解HXY-5菌株；2.根据对菌株HXY-5的形态学观察及分子生物学鉴定，将其归属于间型假丝酵母（Candidaintermedia）；3.单因素和正交试验表明，HXY-5菌株的

5、优化发酵条件是：以无机盐培养基为基础，蔗糖20g，酵母浸粉2g，MgSO4·7H2O0.5g，CaCl20.01g，KH2PO40.5g，初始pH6.0，25℃培养，180rpm培养24h；4.芘降解检测的分析研究表明，HXY-5菌株在芘浓度为100mg/L时，培养15d芘降解率可达到63%；5.对降解关键酶基因检测的研究表明，HXY-5菌株既具有双加氧酶基因，同时也具有单加氧酶基因；6.对HXY-5菌株中的单加氧酶基因进行克隆及转录，可以采用大肠杆菌转化法成功将其转入大肠杆菌。关键词：多环芳烃，芘，降解菌，单加

6、氧酶IIIsolation,IdentificationandCharacterizationofaYeastwithDegradationFunctionAbstractPolycyclicaromatichydrocarbons(PAHs)aretypicalorganicpollutantswithhighecotoxicityandhighbioaccumulation.Becauseoftheirextensiveandhardtodegrade,PAHsbecomeheavypollutioninth

7、eenvironment,difficulttocontrol,andlonglasting.Sourcesofsexualpollution.Pyrene,consistingoffourbenzenerings,isamarkerformonitoringPAHscontaminationandisamodelmoleculeforinvestigatingmicrobialdegradationofPAHs.Existingstudieshaveshownthatindigenousmicrobeshave

8、asignificantlyhigherabilitytorepairPAHs-contaminatedsoilsthanothermicrobes.Theyhaveastrongadaptabilitytotheirenvironmentandaclearcompetitiveadvantage.Inthisstudy,thesludgeoflong-termsinks