溴氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M150150302上海海洋大学硕士学位论文溴氰菊酯降解菌的分离鉴定及题目：其降解特性研究Isolation,identificationanddegradationcharacteristicsof英文题目：deltamethrin-degradingbacterialstrain专业：渔业研究方向：水产动物药理与药残控制技术姓名：苏志俊指导教师：艾晓辉研究员二O一八年五月二十三日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和

2、引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期

3、：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注李爱华中科院水生所研究员主席何绪刚华中农业大学教授委员张家波华中农业大学副教授委员邹世平长江水产研究所研究员委员刘永涛长江水产研究所副研究员秘书长江所综合楼六楼答辩地点答辩日期2018.05.23第三会议室上海海洋大学硕士学位论文溴氰菊酯降解菌的分离鉴定及其降解特性研究摘要拟除虫菊酯类农药（Pyrethroids）作为一种由人工合成模拟天然除虫菊酯的杀虫剂，它有效地克服了传统农药给环境和人类身体健康所带来的危害，凭借其毒性小、起效快、杀虫谱广、残留少等优点，目前已广泛被用于水产养殖和农业灭害中。

4、使用较普遍的拟除虫菊酯类农药主要有溴氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯和甲氰菊酯等。溴氰菊酯（Deltamethrin,DM）是拟除虫菊酯中杀虫活性最强的一个品种。因其具有较高的生物活性，在国内是用量增长最快的农药之一。DM凭借其杀虫谱广、起效快、对哺乳动物低毒等优点，普遍应用于农业灭害、卫生除虫，其主要通过雨水冲刷、生活污水等途径进入自然水环境中，引起污染。渔业生产中常使用DM防治常见淡水鱼类体表锚头鳋、中华鳋、鱼虱等寄生虫，效果显著。随着DM用量的增加，其在养殖水域中的残留也愈来愈大，严重危害了水体环境，由于拟除虫菊酯类杀虫剂耐光、耐热，可在自然环境中残留较长时间，对鱼类等水生生

5、物高毒，很容易导致养殖事故。因此，消除或减少DM农药在水体中的残留污染非常有必要。微生物修复具有高效、无毒、环保等优点，且易于操作，成本较低，为降低农产品和农业生产环境中的农药残留物提供了希望，如今已作为治理农药残留污染的一种有效手段。降解菌能否运用于生产实际，在外界环境中保证稳定的数量和较高的降解活性是生物修复技术亟待解决的问题。如今，诸多学者通过降解菌对蔬菜、土壤的农药残留进行生物修复的研究较为普遍。然而，淡水环境和底泥中拟除虫菊酯类农药降解菌的筛选、降解机理等方面的研究较少。作者通过富集筛选法，以DM为靶农药，采用GC对菌株降解能力进行测定，分离得到一株DM降解菌SW并

6、进行菌种鉴定，研究温度、pH、接种量、药物初始浓度以及不同农药底物等因素对其降解特性的影响，并进一步研究此菌株对养殖淡水中DM的生物修复效果。本研究可为建立有效地去除淡水养殖环境中DM残留的微生物修复技术，保护淡水环境、治理养殖环境农药残留污染提供理论和技术支持。本文首次报道了从鞘氨醇杆菌属(Sphingobacteriumsp.)中分离到DM降解菌，为拟除虫菊酯的生物降解提供了新的菌种资源。主要内容如下：1.采集受菊酯类农药污染菜园耕地土壤样品，以DM为唯一碳源配制无机盐I上海海洋大学硕士学位论文培养基对土样进行增菌培养。设置不同浓度梯度的DM进行逐步驯化，从最后一次驯化培

7、养液涂布得到的平板挑取单菌落，进行划线纯化，对在培养基上生长良好，传代稳定的不同菌株进行标记后，采用GC对菌株降解能力进行测定，筛选分离出1株菊酯农药高效降解菌SW并进行菌种鉴定，根据形态、生理生化分析及16SrRNA序列分析，初步鉴定为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacteriummultivorum)。该菌可以DM为唯一碳源生长，且高度耐受并快速降解DM。30℃、180r·min-1摇床培养5d，对1.0mg·L-1的DM的降解率达76.4%。2.研究明确了菌株SW的降解特性。影响微生物降解污染物