特异性激活shh通路对急性脑缺血大鼠血管再生影响

《特异性激活shh通路对急性脑缺血大鼠血管再生影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityForthedegreeofMasterSpecificActivationoftheSonicHedgehogSignalingPathwayAffectsVascularRegenerationinRatswithAcuteCerebralIschemiaByMeilinZhuSupervisor：Prof．HongyingBaiDepartmentofNeurologyTheSecondClinicalCollegeofZhengz

2、houUniversityMarch，2013学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：睐关嗓日期：、o17年r月27日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家

3、有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者：／木荚秧日期：)ol≥年，月讲日摘要特异性激活SHH通路对急性脑缺血大鼠血管再生影响研究生朱美霖导师白宏英郑州大学第二临床医院神经内科河南郑州450014背景和目的随着人们生活水平的提

4、高，饮食结构、生活方式的改变、人口老龄化的加速，缺血性脑血管病(ICVD)发病率逐年增加，成为危害人类健康的高发疾病之一，研究其发病机制并寻求有效治疗药物成为研究热点。脑缺血病灶区分为缺血区及周围的缺血半暗带区，其中缺血半暗带区的损伤具有可逆性，因此及时恢复血流供应有利于神经功能恢复。挽救缺血半暗带区神经元需要新生血管为其提供营养物质和氧气。如何有效的恢复脑梗死后缺血半暗带的血流供应，提高患者预后，具有重要的意义。Sonichedgehog(Shh)信号转导通路是hedgehog信号通路之一。最近研究发现Shh

5、信号通路与血管再生有着密切的联系。Shh信号通路可促进血管的加粗、变长，可影响基质细胞分泌各种血管再生因子，例如VEGF、CDl05、ANG等。VEGF是最有效的促血管再生因子，能促进内皮细胞增殖分裂，而CDl05是血管再生所必需的，与新生血管内皮细胞密切相关。目前Shh信号通路的研究主要集中在肿瘤方面，而在急性脑缺血后血管再生方面的研究甚少。Shh信号通路主要由Shh蛋白，Ptch蛋白，Smo蛋白和Gli蛋白组成，其中Ptch蛋白是Shh信号通路主要的下游靶基因。Shh信号通路激活时，Ptch蛋白表达上调，因

6、此Ptch蛋白表达增高常作为Shh信号通路激活的标志。Purmorphamine与Shh信号通路中的Smo蛋白结合，是Shh信号通路的特异性摘要激动剂。因此本实验采用大鼠急性大脑中动脉缺血模型，观察Purmorphamine特异性激动Shh信号通路后缺血大鼠脑组织中VEGF、CDl05的表达水平变化，以探究Shh信号通路激活对急性脑缺血大鼠血管再生的影响，为脑缺血治疗提供新的方向。材料与方法采用线栓法制作SD大鼠永久性大脑中动脉缺血(MCAO)模型。选取成年雄性清洁级SD大鼠108只，体重2509～3509。将

7、108只SD大鼠随机分为三组：假手术组(A组)缺血模型组(B组)缺血给药组(C组)，其中假手术组每组12只，缺血模型组、缺血给药组按时间点设立4个亚组：6h、12h、24h、48h，每个亚组各12只。Purmorphamine粉剂使用前用二甲基甲酰胺(DMF)完全溶解。缺血给药组于术后按0．69mg／kg腹腔注射配置好的Purmorphamine溶液，假手术组、缺血模型组给予等剂量的二甲基甲酰胺溶液腹腔注射。于术后观察各时间点各组大鼠的神经功能缺损，并与既定时间点处死大鼠，断头取脑。免疫组织化学方法测定脑缺血后

8、不同时相各组CDl05和VEGF表达，逆转录聚合酶反应(PCR)测定不同时相各组Ptch表达。勿七旦：口7K1．免疫组化测定CDl05表达情况：假手术组脑组织中的CDl05呈弱表达，与之相比较，缺血模型组、缺血给药组脑组织中的CDl05表达增多，差异具有统计学意义(P．<0．05)。急性脑缺血模型组、给药组缺血半暗带区域CDl05于缺血后6小时开始增高，上调趋势延伸到脑缺血后48小时，