氯通道阻断剂nppb抑制术后腹膜粘连的研究

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级：__________UDC：___________氯通道阻断剂NPPB抑制术后腹膜粘连的研究姓名：刘学强学号：2111540150院系：药学院学位类型：专业学位专业：药学研究方向：药物研发与转化导师：徐彬(教授)论文提交日期：2018年5月22日论文答辩日期：2018年5月18日学位授予单位：广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文STUDYONCHLORIDECHANNELBLOCKERNPPBINHIBITIONOFPOSTOPERATIVEPERIT

2、ONEALADHESIONCandidate：LIUXueqiangStudentID：2111540150Affiliation：SchoolofPharmacyAcademicDegreeApliedfor：PharmacySpeciality：NewdrugdevelopmentandtransformationSupervisor：Prof.XUBinAssistantSupervisor：Prof.ZHENGZhaoguangDayofDefence：18May2018Degree-Conferring-Institution

3、：GuangdongPharmaceuticalUniversity52018广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学硕士研究生学位论文氯通道阻断剂NPPB抑制术后腹膜粘连的研究摘要目的：研究氯通道阻断剂NPPB对术后腹膜粘连的抑制作用，并探讨其可能机制，为NPPB作为术后腹膜粘连防治的新药提供科学依据。方法：1）建立大鼠腹膜粘连模型，使用不同浓度NPPB处理，观察NBBP对腹膜粘连形成的影响。2）组织块法对大鼠腹膜粘连成纤维细胞进行原代培养，获取腹膜粘连成纤维细胞。3）免疫荧光法鉴定腹膜粘连成纤维细胞。4）MTT法观察NPPB对腹膜

4、粘连成纤维细胞增殖的影响。5）细胞划痕法观察NPPB对腹膜粘连成纤维细胞迁移的影响。6）全细胞膜片钳技术分析NPPB对腹膜粘连成纤维细胞容积激活性氯电流的影响。7）实时细胞体积监控技术观察NPPB对腹膜粘连成纤维细胞的调节性容积减少（RVD）的影响。结果：1）采用刀刮法造模，成功建立大鼠腹膜粘连模型。2）NPPB明显抑制术后腹膜粘连的形成。3）腹膜粘连成纤维细胞中波形蛋白表达呈阳性。4）NPPB明显抑制腹膜粘连成纤维细胞的增殖。5）NPPB明显抑制腹膜粘连成纤维细胞的迁移。6）NPPB抑制大鼠腹膜粘连成纤维细胞容积激活性氯电流。7）NP

5、PB抑制大鼠腹膜粘连成纤维细胞的RVD。结论：氯通道阻断剂NPPB能有效抑制术后腹膜粘连的形成，其机制是通过抑制腹膜粘连成纤维细胞的容积激活性氯电流，致细胞I广东药科大学硕士研究生学位论文RVD能力下降，进而降低该细胞的增殖和迁移能力，最终抑制腹膜粘连的形成。提示NPPB有开发为临床腹膜粘连防治用药的潜力。关键词：NPPB；腹膜粘连；氯通道II广东药科大学硕士研究生学位论文STUDYONNPPBINHIBITIONOFPOSTOPERATIVEPERITONEALADHESIONABSTRACTObjective:Tostudythei

6、nhibitoryeffectofchloridechannelblockerNPPBonpostoperativeperitonealadhesion,exploreitspossiblemechanism,andprovideevidenceforNPPBasanewdrugforpostoperativeperitonealadhesionprevention.Methods:1)Ratperitonealadhesionmodelwasestablishedandtreatedwithdifferentconcentration

7、sofNPPBtoobservetheeffectofNBBPonperitonealadhesionformation.2)Primarycultureofratperitonealadhesionfibroblastswasperformedwithtissuemasscellculturetoobtainperitonealadhesionfibroblasts.3)Identificationofperitonealadhesionfibroblastsbyimmunofluorescence.4)MTTassaywasused

8、toobservetheeffectofNPPBonproliferationofperitonealadhesionfibroblasts.5)TheeffectofNPPBonthemigrationo