穿心莲内脂对人舌鳞状细胞癌tca8113细胞株增殖和抑制影响的实验研究

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌．太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：搿锈签字日期：弦J并6月岁日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部

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3、1。穿一6莲(AndrographispaniculateNess)是--种爵科植物，现已有许多国家在研究使用‘5～1。研究发现穿心莲中的穿心莲内酯(Andrographolide，AD)不但有抗炎、抗菌、抗病毒作用，还有较强的抗肿瘤作用刚羽。目前AD还未用于舌鳞癌的研究，做此研究有积极的现实意义。本研究目的在于检测AD对人舌鳞癌Tca8113细胞的增殖、细胞周期和BaxmRNA、Bcl．2mRNA表达的影响，从凋亡基因Bax、Bcl．2mRNA的表达情况来探讨AD可能的作用机制，为AD可能成为临床上治疗舌鳞癌的新药物提供了一定依据。研究内容和方法：1．人舌鳞癌Tea811

4、3细胞在常规条件下培养，取对数生长期的细胞用于实验。2．分别加入浓度为O}tg／ml、1099／ml、20}tg／ml、401xg／ml、80}tg／ml、16099／ml的AD作用于Tca8113细胞，分别继续培养24h和48h后，用MTT法检测AD对细胞生长增殖的抑制作用。3．分别加入浓度为Olxg／ml、20I_tg／ml、40I．tg／ml的AD作用于Tca8113细胞，分别继续培养24h和48h后，用流式细胞仪分析AD对细胞周期的影响。4．分别加入浓度为01xg／ml、599／ml、1099／ml、201ag／ml、40I_tg／ml的AD作用于Tea8113细胞

5、，继续培养24h后，用RT-PCR法检测AD对人舌鳞癌Tca8113细胞Bax、Bct．2mRNA表达的影响。结果：1．MTT结果显示，AD作用Tca8113细胞后，能够显著地抑制细胞的增殖；分别加入浓度为0Itg／ml、10l-tg／ml、20lxg／ml、40Ltg／ml、8099／ml、160I．tg／ml的AD作用Tca8113细胞24h后，细胞的抑制率分别为(O土O)％，(2．37士0．19)％，(11．34+1．01)％，(36．65士1．99)％，(49．61+3．34)％，(72．11土5．01)％；AD作用摘要Tca8113细胞48h后，细胞的抑制率分别为

6、(0+0)％，(11．37士1．01)％，(27．43+1．93)％，(46．08士3．28)％，(65．59+6．33)％，(79．47+7．33)％。Tea8t13细胞在AD作用相同的时间里，随着实验剂量范围内AD浓度的增加，细胞的抑制率逐渐升高(P<0．05)；而同一AD浓度组的细胞被AD作用48h的抑制率比作用24h的抑制率高(火O．05)，具有明显的剂量一时间依赖性。利用SPSS软件计算出舌鳞癌细胞被AD作用24h后的IC50值为74．66rtg／ml。2．流式细胞术(FCM)结果显示，浓度分别为099／ml、2099／ml、401xg／ml的AD作用于Tca81

7、13细胞24h后，细胞周期中的Go／G1期细胞比例分别为(39．45+0．56)％，(49．10-土0．81)％，(56．61土0．64)％，S期细胞比例分别为(56．55+0．53)％，(46．57-4-0．60)％，(36．86士0．73)％。不同浓度的AD作用Tca8113细胞48h后，细胞周期中的Go／G1期细胞比例分别为(40．16+1．03)％，(57．34+0．65)％，(63．70：士0．65)％，S期细胞比例分别为(58．31+0．75)％，(37．23+0．76)％，(32．28+0．54)％。