人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的时间窗及iNOS表达研究.pdf

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号：___________密级：__________UDC：___________人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的时间窗及iNOS表达研究姓名：黄冠灵学号：2111542009院系：研究生学院学位类型：学术学位专业：内科学研究方向：脊髓损伤的干细胞疗法导师：黄怀教授论文提交日期：二〇一八年四月二十日论文答辩日期：二〇一八年五月十五日学位授予单位：广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文ThestudyontimewindowandiNOSexpressionofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcell

2、transplantationinspinalcordinjuredratsCandidate：HuangGuanlingStudentID：2111542009Affiliation：SchoolofGuangdongPharmaceuticalUniversityAcademicDegreeApliedfor：MasterofMedicineSpeciality：GraduateschoolSupervisor：Prof.HuangHuaiAssistantSupervisor：Prof.ShenDantongDayofDefence：May2017Degree-Conferring-I

3、nstitution：GuangdongPharmaceuticalUniversity广东药科大学硕士研究生学位论文广东药科大学学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，系我个人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。除文中已特别加以标注和致谢的地方外，不包含其它个人或机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究做出贡献的其它个人和集体，均已在文中明确说明和致谢。本人充分意识到本声明的法律结果完全由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文使用授权的声明本人完全了解广东药科大学有关保留和使用学位论文的规定，学校有权保留和向有关部门或机构送交本论文的复印件和电子版，允许论文被查

4、阅和借阅。学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库，可以采用影印、缩印或其它复印手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后适用本声明。论文作者签名：论文导师签名：日期：年月日广东药科大学硕士研究生学位论文人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的时间窗及INOS表达研究摘要研究背景和目的：脊髓损伤（spinalcordinjury，SCI）是由外伤、感染、缺血或相关病变累及引起的中枢神经系统疾病，致残率和致死率极高，给家庭和社会造成沉重负担。如何使受损的神经结构进行再生和修复，从而促进神经功能障碍尤其是运动功能障碍的恢复仍是当前治疗的难点和研究的热点。已有研究表明人脐带间充质干细胞(

5、Humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hUC-MSCs)移植可治疗SCI，但少有对其最佳移植时机和机制进行探索。本研究的目的是明确hUC-MSCs治疗SCI的最佳时间窗以及诱导型一氧化氮合酶（inducednitricoxidesynthase，iNOS）表达的变化，为临床应用提供参考。方法：购入并通过贴壁法培育hUC-MSCs，采用改良Allen’s法制作大鼠SCI模型。将45只SD大鼠随机分3大组：假手术组、模型组和hUC-MSCs组，每组15只。假手术组只暴露T8~T10节段椎板，模型组在暴露后予以打击；hUC-MSCs组按SCI后细胞移植时间分

6、为0h组、8h组、48h组、1w组和2w组，每组3只，分别在SCI后经尾静脉注入1×106/ml×1mlhUC-MSCs。在干预后第3d、7d、14d、21d和28d使用大鼠后肢运动功能评分(Basso,BeattieandBresnahanlocomotorratingscore,BBB)量表评估各组大鼠后肢运动功能得分，评I广东药科大学硕士研究生学位论文分完成后用心脏灌注法取脊髓标本并采取印迹法测量iNOS表达水平。使用SPSS软件中的t检验探寻hUC-MSCs治疗大鼠SCI的有效性，通过比较移植组内各时间窗植入hUC-MSCs后大鼠运动功能得分的差异找出最佳移植时机和iNOS变化规律。

7、结果：随着时间推移，假手术组BBB评分无明显变化，模型组和hUC-MSCs组BBB评分逐渐提高，尤其在损伤后1w和2w之间上升最显著。与假手术组比较，模型组和hUC-MSCs组BBB得分下降且iNOS表达量增多；hUC-MSCs组与模型组比较，BBB得分提高更明显（p＜0.05）且iNOS表达量更少。hUC-MSCs组内,48h组和1w组与其他组比较，BBB评分提高更明显且iNOS表达水平更低。讨论：本研究结