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1、分类号S852.4学校代码10129UDC579学号2010201048片球菌的分离鉴定及青贮接种剂的研制IsolationandIdentificationofPediococcusandStudyofSilageInoculant申请人:隋鸿园学科门类:农学学科专业:预防兽医学研究方向:兽医微生物学与免疫学指导教师:周雨霞副教授论文提交日期:二〇一三年六月摘要本研究应用传统的细菌分离鉴定方法从来源于内蒙古呼和浩特小丹坝牧场和奶联社牧场的青贮样中,分离得到片球菌10株。其中戊糖片球菌2株,乳酸片球菌8株。通过温度生长试验、产酸试验、耐酸试验、耐渗透
2、压试验和抑菌试验,从本实验室保存的8株植物乳杆菌、7株肠球菌和经分离鉴定的10株片球菌中,各筛选出1株适合作青贮接种剂的乳酸菌,即植物乳杆菌48-2、粪肠球菌44-1和乳酸片球菌P-1。它们可以在25~37℃、pH4.0~5.0和4%~6%NaCl中较好生长,能互补利用青贮原料中的碳水化合物,并且对大肠杆菌有较好的抑菌性。将3株乳酸菌进行了复合青贮接种剂的研制。相同原料不同乳酸菌组合的试验结果显示:无论是试验组还是对照组,在青贮第3d,青贮料中乳酸菌活菌数达到最高值,发酵温度也达到最高。在青贮过程中,添加3种乳酸菌组的青贮料中乳酸菌活菌数显著高于添加
3、2种乳酸菌组和对照组(P<0.05),而pH值显著低于添加两种乳酸菌组和对照组(P<0.05)。结合青贮饲料评定结果,发现由3种乳酸菌组成的复合青贮接种剂的青贮效果最好。通过3种乳酸菌组成的复合青贮接种剂对不同来源的青贮原料的青贮效果研究,结果表明:各试验组青贮料中乳酸菌活菌数显著高于相应对照组(P<0.05),而pH值则显著低于相应对照组(P<0.05)。但试验组之间以及对照组之间,青贮料中乳酸菌活菌数和pH值无显著差异。说明3种乳酸菌组成的复合青贮接种剂对不同来源青贮原料的青贮效果无差异,均能显著提高不同来源原料的青贮品质。关键词:乳酸菌;分离;
4、鉴定;筛选;青贮接种剂IsolationandidentificationofPediococcusandStudyofSilageInoculantAbstractLacticacidbacteriawereisolatedandidentifiedfromthesilageofInnerMongoliaHohhotsmalldampastureandmilkcooperativefarmbyconventionalbacteriologicalmethods.10strainsofPediococcusweresuccessfullyscreen
5、edfromsilagesamplesofdifferentsources,including2strainsofP.pentosaceusand8strainsofP.acidilactici.Bythetemperaturegrowthtest,thetestofproducingacid,acidresistance,bilesalttolerance,threestainswererespectivelychosefrom8strainsofLactobacillusplantarum,7strainsofEnterococci,whichw
6、aspreservedinmicroballab,and10strainsofPediococcus,whichwereL.plantarum48-2,E.faecalis44-1andP.acidilacticiP-1.3stainsofthelacticbacteriacanbegrowedat25~37℃,pH4.0~5.0,4%~6%NaCl,andusedthecarbohydrateofthesilage,andhadgoodbacteriostaticeffecttoE.coli.3stainsofthelacticbacteriawe
7、restudiedassilageinoculants.Resultsofthesamerawmaterialsanddifferentcombinationoflacticacidbacteriashowedthat:Eithertheexperimentalgrouporthecontrolgroup,boththeviablecountofthelacticacidbacteriaandthesilagetemperaturereachedthehighestvalueonthethirddayinsilage.Duringensiling,a
8、ddingthreestrainsoflacticacidbacteria,theviablecountof