涎腺分泌蛋白salp15对全沟硬蜱传播莱姆病螺旋体效能的影响

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1、安徽医科大学硕士学位论文分类号：密级：UDC：编号：学位论文论文题目涎腺分泌蛋白Salp15对全沟硬蜱传播莱姆病螺旋体效能的影响英文题目ReducesLymespirochetestransmissionefficiencyofIxodespersulcatuswithticksalivaryprotein15kDaasantigens姓名王欣孙毅指导教师姓名安徽医科大学（至军事医学科学院院、微生物流行病研究所）申请学位级别硕士专业名称病原生物学提交论文日期2013.05.02论文答辩日期2013.05.24学位授予单位和日期安徽医科大学

2、答辩委员会主席评阅人年月-1-安徽医科大学硕士学位论文学位论文独创性声明本人所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确说明并表示谢意。学位论文作者签名：日期：学位论文使用授权声明本人完全了解安徽医科大学有关保留、使用学位论文的规定：学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权允许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数

3、据库进行检索，有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。愿意将本人的学位论文提交《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》和《中国学位论文全文数据库》中全文发表，并可以以电子、网络及其他数字媒体形式公开出版，并同意编入CNKI《中国知识资源总库》，在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播。保密的学位论文在解密后适用本规定。学位论文作者签名：导师签名：日期：日期：-2-安徽医科大学硕士学位论文目录缩略词表…………………………………………………………………1中文摘要…………………………………………………………

4、………2英文摘要…………………………………………………………………4前言…………………………………………………………………………7一全沟硬蜱复合组Salp15蛋白超家族的多样性……………………111.1全沟硬蜱Salp15编码序列的扩增…………………………………111.2.1材料…………………………………………………………………111.2.2方法…………………………………………………………………111.2.2.1全沟硬蜱唾液腺蛋白Salp15CDS序列扩增引物设计………111.2.2.2全沟硬蜱叮咬……………………………………………………

5、121.2.2.3半饱血蜱RNA提取………………………………………………131.2.2.4聚合酶链式反应扩增目的基因及克隆…………………………141.3结果……………………………………………………………………151.3.1琼脂糖凝胶电泳检测全沟硬蜱RNA………………………………151.3.2Salp15目的基因片段和克隆……………………………………161.4讨论……………………………………………………………………181.4.1硬蜱属蜱类Salp15蛋白的多样性………………………………181.4.2全沟硬蜱Salp15蛋白家族在转录水平上的

6、多样性……………231.4.3全沟硬蜱Salp15蛋白Ipers-5……………………………………23二Salp15蛋白Ipers-5融合蛋白表达体系建立及优化……………241.1材料……………………………………………………………………241.2方法……………………………………………………………………271.2.1表达载体构建………………………………………………………271.2.2诱导表达融合蛋白…………………………………………………29-3-安徽医科大学硕士学位论文1.2.3融合蛋白的纯化……………………………………………………301.2

7、.4酶切重组蛋白,去MBP标签蛋白…………………………………311.2.5纯化去标签的融合蛋白……………………………………………311.2.6Western-blotting…………………………………………………321.3结果……………………………………………………………………321.3.1阳性克隆鉴定结果…………………………………………………331.3.2融合蛋白的表达……………………………………………………331.3.3融合蛋白纯化………………………………………………………331.3.4Western-blotting分析融合蛋白……

8、…………………………361.3.5融合蛋白去标签并纯化……………………………………………361.4讨论……………………………………………………………………36三Salp15家族蛋白对莱姆病螺旋