不同血清培养基对cik细胞表型与功能的影响

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1、技术方法不同细胞培养基与血清对细胞因子诱导的杀伤细胞功能的影响高群1,2，王菲1,3，王丽萍2，杨黎1，张震1,2，岳冬丽1,2，王盟1,4，张毅1,2,3,5（1．郑州大学第一附属医院生物细胞治疗中心,河南郑州450052；2.郑州大学第一附属医院肿瘤科,河南郑州450052；3.郑州大学生命科学院,河南郑州450001；4.郑州大学第一附属医院消化内科,河南郑州450052；5.河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,河南郑州450052）[基金项目]国家自然科学基金资助项目(No.81171986，No.81271815)。Projectsupp

2、ortedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No.81171986，No.81271815).卫生部科研攻关基金(No.20110110001)。ProjectsupportedbyResearchGrantfromtheChineseMinistryofHealth(No.20110110001).河南省科技厅基础与前沿技术研究基金(No.112300410153，No.122300410155)。ProjectsupportedbytheBasicandAdvancedTechnologyRes

3、earchFoundationfromScienceandTechnologyDepartmentofHenanProvince(No.112300410153，No.122300410155).河南省科技厅科技创新人才计划（No.124200510006）。ProjectsupportedbyNaturalScienceFundofHenanProvince（No.124200510006）.郑州大学第一附属医院院内创新团队基金。ProjectsupportedbytheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUnivers

4、ity.[作者简介]高群(1988-)，女，黑龙江省齐齐哈尔市人，硕士生，主要从事肿瘤的生物细胞免疫治疗研究。Email:qungao1988126@126.com[通信作者]张毅(ZhangYi,correspondingauthor),Email:chyizhang@gmail.com[摘要]目的：探讨不同细胞培养基及血清对细胞因子诱导的杀伤（cytokine-inducedkiller，CIK）细胞功能的影响。方法：采集6例肺癌患者外周血，分离获得单个核细胞，按照不同血清与培养基分为8组：GT-T551培养基加入患者自体血清组、GT-T551培养基

5、加入健康人血清组、GT-T551培养基加入FBS组、GT-T551培养基组、RPMI1640培养基加入患者自体血清组、RPMI1640培养基加入健康人血清组、RPMI1640培养基加入FBS组，及RPMI1640培养基组。采用CFSE染色法检测细胞增殖能力，流式细胞术检测CIK细胞CD3+CD8+T细胞及CD3+CD4+T细胞GranzymeB、IFN-γ的分泌情况及CD3+CD56+T细胞、CD3+CD4+T细胞及CD3+CD8+T细胞表面CD107a的表达。结果：GT-T551培养基加入患者自体血清组的CIK细胞，其增殖指数显著高于其他培养条件组（P

6、<0.05）。在细胞杀伤功能实验中检测CD3+CD56+NKT细胞显示，GT-T551培养基[（7.10±1.94）%vs（2.73±0.79）%，P<0.0001]或RPMI1640培养基[（4.45±1.96）%vs（2.52±0.76）%，P=0.021]中加入患者自体血清组CD3+CD56+NKT细胞表面CD107a的表达显著高于加入健康人血清组。GT-T551培养基[（22.85±3.50）%vs（13.28±1.75）%，P<0.0001]或RPMI1640培养基[（22.57±3.45）%vs（15.37±4.08）%，P<0.0001]中

7、加入患者自体血清组CD4+T细胞颗粒酶B的分泌水平显著高于加入健康人血清组，而且GT-T551培养基中加入患者自体血清组CD8+T细胞分泌IFN-γ的能力显著高于加入健康人血清组[（16.55±3.53）%vs（11.17±4.91）%，P=0.007]。结论：GT-T551培养基加入患者自体血清更有利于CIK细胞的增殖，及发挥杀伤功能，为优化CIK细胞培养体系提供实验依据。[关键词]：CIK（细胞因子诱导的杀伤）细胞;培养基;血清;功能[中图分类号]：R730.3Effectsofdifferentcellculturemediumandserumon

8、thefunctionofcytokine-inducedkillercells