丝状真菌发酵生产多不饱和脂肪酸的研究注

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1、万方数据2001年12月第16卷第6期中国粮油学报JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationVo】．16．No6Dec．加01丝状真菌发酵生产多不饱和脂肪酸的研究注为2A何东平1陈涛2孙松柏2童晓2宋建华2田华2宋光森(武汉工业学院1，武汉430022)(中国科学院武汉病毒研究所2，武汉430071)摘要用丝状真茵发酵生产多不饱和脂肪酸，时茵株筛选，谤变选育，中试发酵进行了研究．发酵生物量为499茵／Hk．／L发酵液，舍油率42．75％～47．78％，产油量19．79／L发酵液，7一亚麻酸5．78％～6．59％

2、，花生四烯酸4．6％，确定了工艺技术路线，分析了产品的理化指数，为微生物油脂的工业化生产提供了依据。关硅词丝状真茵发酵制取多不饱和脂肪酸0前言在国外，日本、英国、法国、美国等地进行微生物产生多不饱和脂肪酸的研究，所用菌株多为被孢霉菌类，如深黄被孢霉(Mortierellaisabellina)，葡酒色被孢霉(M．vinacea)，拉曼被孢霉(M．ramanniana)，矮被孢霉(M．n¨a)⋯，高山孢霉(M．alpinaIS一4)“3等，而以深黄色被孢霉及其突变株研究最多。每升发酵液含干菌体15．Og～柏．09，油脂含量30％一70％，脂肪酸中7一亚麻酸含

3、量3％～11％，由于各家所用培养基成份不一，如含不可溶性物质、饼类、淀粉类等均对干菌丝体生物量有较大差别。据报道日本、英国已有微生物生产7一亚麻酸的工业产品面世，但至今我们投有获得该产品样品。在国内研究单位有：上海市工业微生物研究所~31已完成中试，干菌体生物量为3％～5％，总脂肪得率加％一50％；福建师范大学“一与工厂合作在60一发酵罐中试生产，利用菌株以M．isa．bellinaAS．3．3410为出发株的突变株M018株，采用三级发酵(即两级液体种子)，使生物量达到37．鲰干菌体／L发酵液，油脂产量达792％，7一亚麻酸产7％左右，他们收集菌体后，粉

4、碎，制成胶囊，作为食品保健品出售。参与研究的单位还有辽宁省分析测试研究中心L5J、中国科学院上海植物生理所”、华南理工大学”J、西安油脂科学研究设计院(固体发酵)”]、南京师范大学”J、曲阜师范大学【9j、南开大学“o’等单位，仍处在实验阶段，研究特点各有谴：1998年湖北教膏厅科学研究计划项目收蔫日期：2000一08一邮何东平：男，教授．1957年生，食品科学与工程专业千秋。我们在菌株筛选，诱变选育，中试发酵等方面与国内研究水平相当，发酵生物量可达499干菌体／L发酵液，含油率42．75％～47．78％，产油量19．79／L发酵液，Y一亚麻酸578％～6

5、．59％，花生四烯酸4．6％。1高产油脂菌株的筛选1．1研究用菌株(本研究采用菌株如表1)1，2目标筛选根据参考文献，我们采用如下指标对11株出发菌株进行目标筛选。1．2．1菌生长性能：在PDA培养基上包括斜面种子，培养皿平面种子和三角瓶平面种子，能在接种分生孢子后24h萌发成菌丝体，5d～7d形成孢子；在摇瓶中培养24h，即可看到瓶壁有较多菌丝体，培养4d左右即可收获。1，22菌体孢子及培养的外观指标：菌丝体丰满、均匀、色泽较均一、无塌陷和老化现象。分生孢子色泽均一，孢子量大。1．2．3显微镜检查：菌丝体粗壮均一、完整无破损现象，摇瓶生长两天后即可看到菌

6、丝体内有点滴状的油脂，呈透亮黄色。这将是生产中的一项指导放罐的重要指标。菌形成的分生孢子呈大小均一，形状一致、无残缺不齐或畸形。1．2．4生物量：生物量是每升发酵液所获得的干菌量，用g干菌体／L发酵液来表示。1．25干菌体含油量：一是外观菌丝体含油多少，二是提取油脂看含油率(％)，用g油／1009于菌体来表示。万方数据第16卷第6期何东平等丝状真菌发酵生产多不饱和脂肪酸的研究一表I研究所用原始菌株及来源苗名菌号束源布拉氏须霉Phycornye∞blakes神amls少根根霉肌唧Ⅺ衄^扣探黄色被孢霉Mortierellaisahdlina土曲霉{-叩m．-。

7、唐nW黑曲霉{j‘·营M．，‘w竹扣n“赭曲霉舢孵gnkod口aoeus米根霉IOugopuso№毛霉属三孢布拉氏霉州吐口ktrispora二孢布拉氏霉Blaitesleatrispora三擅布拉氏露剧越口k上，4apora32(bl326673341031367394003140838660(+)31887(+)A1℃c14060(-6)ATCC]4059购自中国科学院J匕京微斗物所购自中周科学院北京馓生物所购自中国科学院北京微生物所购自中国科学院北京微生物昕购自中同科学院北京微生物所购自中国科学院北京微生物所中国科学院武汉病毒所保藏中国科学院武汉病毒所

8、分离保藏自台湾引进^TCC^代C1．2．6油脂的各项指标分析：包括