资源描述:
《中华按蚊击倒抗性突变p c r 检测方法的建立》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、1002-2694(2011)11-1008-03中华按蚊击倒抗性突变PCR检测方法的建立武松1马尔健2刘茜1陆群2仰凤桃2洪结凤1叶苗青1俞俊峰1摘要:目的建立可靠的中华按蚊拟除虫菊酯击倒抗性的PCR检测方法。方法基于课题组前期研究发现的拟除虫菊酯抗性中华按蚊钠离子通道蛋白(VGSC)L1014位点的突变机制,即TTG突变为TTT和TGT,设计特异AS-PCR引物,进行中华按蚊拟除虫菊酯杀虫剂抗性突变检测。结果设计的AS-PCR引物和建立的反应体系可以分别扩增出现已发现的中华按蚊击倒抗性的TTG(T)杂合、TTT纯合、TG(T)G(T)杂合、TG(
2、T)T杂合,PCR电泳图结果与测序图结果一致。结论成功建立中华按蚊击倒抗性突变的PCR检测方法,可用于现场中华按蚊的击倒抗性检测。中华按蚊;拟除虫菊酯;击倒抗性;PCR;检测R384AEstablishentofAS-PCRmethodfordetectingtheknockdownresistanceofAnophelessinensisWUSongMAEr-jianLIUQianLUQunYANGFeng-taoHONGJie-fengYEMiao-qingYUJun-feng安徽省自然科学基金(No.10040606Q38);安徽省优秀青年教师
3、基金项目(No.2009SQRZ119);合疾控科研(No.2011-3)和第五轮中国全球基金疟疾项目实施性研究专项基金(No.GF/M5/2010-04)联合资助1.安徽中医学院中西医结合临床学院,合肥2300382.合肥市疾病预防控制中心,合肥230061万方数据2结果万方数据@@[1]王伟明,金小林,周华云,等.江苏省全国疟疾监测点疫情分析[J].中国血吸虫病防治杂志,2007,19(3):220-223.@@[2]沈宝祥,李菊林,周华云.中华按蚊对常用菊酯类杀虫剂抗性现场调查[J].中国血吸虫病防治杂志,2002,14(2):148-149.
4、@@[3]潘波,朱泰华,刘勇鹰,等.我国主要传疟媒介对杀虫剂的敏感性现状[J].中国媒介生物学及控制杂志,2001,12(2):145-148.@@[4]张华勋,李凯杰,胡乐群,等.中华按蚊对常用杀虫剂的抗药性监测[J].中国热带医学,2010,10(4):400-401.@@[5]李菊林,周华云,曹俊,等.江苏省部分地区中华按蚊对溴氰菊酯和氟氯氰菊酯的敏感性调查[J].中国媒介生物学及控制杂志,2009,20(5):438-439.@@[6]李志,杨德香,丁俊,等.蚊虫抗药性监测研究[J],中华卫生杀虫药械,2007,13(4):256-258.@
5、@[7]陆宝麟,等.中国动物志昆虫纲第九卷双翅目蚊科(下卷)[M].北京:科学出版社,1997:86-103.@@[8]KambhampatiS,BlackWC,RaiKS.RandomamplifiedpolymorphicDNAofmosquitospeciesandpopulation(Diptera:Culicidae):techniques,statisticalanalysis,andapplications[J].MedEntomology,1992,29(6):939-945.@@[9]武松,张国庆,许娴,等.安徽省中华按蚊钠离子通道
6、蛋白基因的击倒抗性突变[J].中国病原生物学杂志,2010,12(5):922-924.@@[10]EnayatiAA,VatandoostH,LadonniH,etal.MolecularevidenceforaKdr-likepyrethroidresistancemechanisminthemalariavectormosquitoAnophelesstephensi[J].Medicalandveterinaryentomology,2003,17:138-144.@@[11]RansonH,JensenB,VululeJ,etal.Iden
7、tificationofapointmutationinthevoltage-gatedsodiumchannelgeneofKenyanAnophelesgambiaeassociatedwithresistancetoDDTandpyrethroid[J].Insectmolecularbiology,2000,9(5):491-497.@@[12]SantolamazzaF,CalzettaM,EtangJ,etal.Distributionofknock-downresistancemutationsinAnophelesgambiaemol
8、ecularformsinwestandwest-centralAfrica[J].Malariajourn