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《微生物对石油烃降解代谢产物的分析方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、第22卷第2期 海 洋 水 产 研 究 Vol.22,No.22001年6月MARINEFISHERIESRESEARCHJun.,2001微生物对石油烃降解代谢产物的分析方法研究122111冷凯良 楚晓珉 张辉珍 李兆新 尚德荣 李晓川(1中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛266071)(2青岛市产品质量监督检验所,266071)摘要 对实验室内微生物降解原油的代谢产物进行了色谱、质谱、紫外光谱等一系列研究,建立了微生物对原油代谢产物的分析方法。实验表明,微生物降解原油代谢产物主要是乙酸和以棕榈酸为主的脂肪酸与鼠李糖形成的糖酯类表面活性剂。关键词 石油污染
2、微生物降解 代谢产物 分析方法Studyonanalyticalmethodsofmicrobialmetabolitesanddegradationtopetroleumhydrocarbon122LENGKai2liangCHUXiao2minZHANGHui2zhen111LIZhao2xinSHANGDe2rongLIXiao2chuan(1YellowSeaFisheriesResearchInstitute,Qingdao266071)(2QingdaoProductsQualitySupervisingandTestInstitute,266012)ABSTRACTBa
3、sedondeterminationofGC,GCöMS,UV,aseriesofanalyticalmethodformicrobialmetabolismandmetabolicproductshasbeendeveloped.Theresultindicatesthatthemainmetabolicproductofpetroleumhydrocarbondegradationisaceticacidandsurfaceactiveagentofglycolipidcomposedoffattyacidandrhamnose.KEYWORDSPetroleumpollutionM
4、icrobialdegradationMetabolicproductsAnalyticalmethods 石油污染是严重的海洋污染物之一。随着海洋石油资源的开发以及海上交通运输业和沿岸石油化工业的发展,海洋石油污染日益严重。进入海洋环境的石油污染物质大部分滞留在海洋底栖环境中,因而极大地影响着海洋底栖生物的正常生长。海洋环境中大量石油污染物的存在,使海洋水质下降,严重破坏了海洋生态环境。有关石油在海洋环境中的迁移、降解和对海洋生态系统影响的研究已引起了国内外的广泛关注。一般认为微生物将降解大部分海上原油成分,有关利用微生物降解石油烃类,消除石油污染的文献很多,但由于原油组成和微生物代
5、谢体系的复杂性,目前在代谢作用及产物分析方法方面仍然没有系统的可以遵循的方法。微生物代谢作用及产物分析方法的研究,对认识微生物降解石油污染物的机理有重要理论意义。对新型微生物菌种的筛选及性能评价工作亦有重要的实用价值。为此,作者在实验室内选择大港油田的原油作为微生物的唯一碳源,对其代谢产物进行了分析研究,并在一系列实验研究的基础上,建立了微生物对原油的降解代谢产物的分析方法。收稿日期:2001203216;接受日期:2001204220©1995-2006TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.58海 洋 水 产 研 究
6、 第22卷1 材料与方法1.1 实验材料Na2HPO4·12H2O,KH2PO4,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2O,NaNO3,CaCl2,酵母膏,N80菌种(假单孢菌属,革兰氏阴性)。原油:大港油田G6928原油。1.2 实验仪器灭菌锅,发酵罐,高速离心机,真空泵,pH计,气相色谱仪,气相色谱2质谱联用仪;高效液相色谱仪和紫外分光光度计。1.3 发酵培养方法按比例配制发酵培养基,高温灭菌。开动发酵反应器,进行接种发酵。发酵温度:60℃,搅拌速度:200römin,发酵时间:8d。1.4 样品处理发酵结束后,用微孔滤膜进行油水分离,水相进一步处理后
7、进行代谢产物分析,油相进行降解后组分的定性分析。1.5 小分子有机酸的分析1.5.1 总酸测定取连续发酵8d的发酵液,过滤去油,离心除菌后测定。测定方法:取离心后发酵液20ml,加2滴甲基红2亚甲基兰指示剂,用C(NaOH)=010209molöL标准溶液滴定,同时以发酵前溶液为空白进行空白滴定。1.5.2 小分子有机酸的分离提取方法A:取发酵液300ml,经0145Lm滤膜过滤去油体,水相经高速离心(8000～10000römin
