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时间:2019-03-05
《初级检验士考试(微生物学检验)讲义第二十七章病毒感染的实验诊断》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、woed版-精品资料病毒感染的实验诊断●考点 病毒的生物学性状 病毒的实验室检查方法 常见病毒的感染 【内容讲解】第一节 概述 一类非细胞型微生物,个体极小,可通过细菌滤器,需用电子显微镜观察。 仅含一种核酸作为遗传物质,外被蛋白质衣壳或还有包膜。 病毒只能在活细胞内寄生,以复制的方式进行增殖。 在临床微生物感染中,近75%的传染病是由病毒引起的。 一、病毒的基本性状 (一)形态结构 1.大小和形状: 大小:测量单位用纳米表示,一般在20-300nm之间。 形态大致可分为:球形或近似球形、杆状、弹形、砖形、蝌蚪形等
2、。 2.结构 精品资料分享woed版-精品资料 (二)病毒的增殖 病毒必须依赖宿主细胞, 以特殊的自我复制方式进行增殖。 病毒的复制周期: 吸附、穿入、脱壳、生物合成、 组装与成熟、释放6个阶段。 异常增殖: 顿挫感染:病毒进入细胞后的环境不利于它的复制,不能合成本身的成分或不能组装和释放有感染性的病毒颗粒。 缺陷病毒:由于病毒基因组不完整或基因位点改变而不能进行正常增殖的病毒。 干扰现象:当两种不同的病毒或两株性质不同的同种病毒,同时或先后感染同一细胞或机体时,可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。 (三)
3、噬菌体 以细菌、真菌等为宿主,能引起细菌等裂解的病毒。 噬菌体特异性识别细菌表面受体,可用于进行细菌的鉴定与分型。 噬菌体感染细菌后产生两种后果: 溶菌周期和溶源性周期。 精品资料分享woed版-精品资料 (四)非寻常病毒 比病毒更小更简单的致病因子,又称为亚病毒因子,包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。 朊粒个体微小,不含核酸,其主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白,对各种理化作用的抵抗力强,具有传染性,是引起传染性海绵状脑病的病原体。 朊粒致中枢神经系统退化性病变,引起牛海绵状脑病(疯牛病)。克雅病(CJD)和Kuru病被认为与朊粒
4、感染有关。 二、病毒的分类与命名 科、属、种3级或科、亚科、属、种4级。 DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒三大类。 按传播途径可分为呼吸道病毒、胃肠炎病毒、经性传播感染的病毒等。 按感染部位与症状特征可分为肝炎病毒、出血性热病毒、疱疹病毒等。第二节 病毒感染的实验诊断 病毒学实验室诊断有三个方面: ①直接检测和分离鉴定; ②检测病毒蛋白抗原成分和核酸; ③检测抗体。 一、标本采集、运送及处理 (一)标本采集 1.采样时机:应在病人急性期或发病初期采集标本。 2.标本种类: 根据不同病毒感染采集不同
5、标本,如鼻咽分泌物、脑脊液、血液、粪便等。 (二)标本的运送及保存 快速传递,立即处理和接种。 采集和运送过程注意冷藏。如不能立即处理和接种,可在4℃保存数小时,长时间保存需置-70℃。 (三)标本处理 凝固的血液需先离心,得到的血清可以用于病毒分离。 肝素抗凝全血、脑脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分离培养。 有些标本如粪便等,常需粗提、提纯和浓缩等复杂处理过程。 二、分离培养与鉴定 (一)分离培养 1.组织培养 包括器官培养、组织块培养和细胞培养。 目前常用的方法是细胞培养; 常用细胞: ①原代和次
6、代细胞培养;②二倍体细胞株;③传代细胞系。 2.鸡胚接种 一般选用9-12日龄鸡胚。鸡胚中的部位适宜病毒卵黄囊嗜神经病毒,如乙型脑炎病毒羊膜腔流感病毒尿囊腔流感病毒、腮腺炎病毒,还可制备疫苗和大量病毒抗原绒毛尿囊膜天花病毒、单纯疱疹病毒脑内狂犬病病毒精品资料分享woed版-精品资料 3.动物接种 实验室常用新生小鼠或乳鼠进行病毒分离。 (二)病毒鉴定 1.初步鉴定 根据临床症状、流行病学特点、标本来源、易感动物范围、细胞病变特征及生物学特征、理化性质可初步判断病毒的科及属。 2.最终鉴定 在初步鉴定的基础上,选择适当的血清学方法
7、对病毒分离株进行最后鉴定,常用中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、免疫荧光试验、酶免疫试验等。分子生物学方法也在病毒鉴定方面得到应用。 初步鉴定(举例): 细胞病变效应(CPE):细胞形态变化病毒细胞圆缩,分散,不聚集,全部细胞被破坏肠道病毒细胞肿大,颗粒增多,病变细胞聚集呈葡萄状腺病毒细胞融合成多核细胞副粘病毒,疱疹病毒空泡状,多核巨细胞麻疹病毒 脂溶剂敏感实验:有包膜(+),无包膜(-); 耐酸实验:肠道病毒(R),鼻病毒(S)。 三、病毒感染的诊断精品资料分享woed版-精品资料 (一)显微镜检查 1.用光学显微镜直接
8、检查病毒包涵体。可作为病毒感染的辅助诊断,不是特异性试验。 核内包涵体:常见DNA病毒。如巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒和腺病毒等。 胞浆内包涵体:常见RNA病
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