乙型脑炎病毒靶序列浓度对lsaw基因传感器检测系统的影响

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1、乙型脑炎病毒靶序列浓度对LSAW基因传感器检测系统的影响徐清华1，陈鸣1，府伟灵2，王云霞2，丁毅3，施建峰3，曹亮3(1第三军医大学第三附属医院检验科，重庆400042；2第三军医大学第一附属医院检验科，重庆400038；3中国电子科技集团公司第二十六研究所第五研究室，重庆400060)　提要:目的　探讨乙型脑炎病毒(JEV)靶序列浓度值对漏声表面波（LSAW）基因传感器检测系统的影响。方法LSAW基因传感器表面固定终浓度为0.5μmol/L的JEV探针，然后在pH7.6的10mmol/LPBS缓冲液（含Na+0.3mol/L）中和

2、终浓度为0.05、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0umol/L的JEV靶序列杂交，分别记录相位变化及反应所需时间。结果　与JEV探针反应引起的相位变化是先缓慢上升后趋于缓和的趋势，以1.0umol/L靶序列浓度为分界线。杂交平衡时间上除0.05umol/L的时间短以外，其它的未见明显变化趋势。结论　随着靶序列浓度的升高，杂交反应引起的相位变化呈典型的饱和曲线趋势，1.0umol/L靶序列浓度与探针杂交最为适宜。　　关键词:漏声表面波；基因传感器；相位；乙型脑炎病毒；杂交EffectsofJapaneseEncephalitisV

3、irusTargetConcentrationsonLSAWGeneSensorDetectionSystemXUQing-hua1，CHENMing1，FUWei-ling2,WANGYun-xia2，DINGYi3，SHIJian-feng3，CAOLiang3(1DepartmentofClinicalLaboratoryMedicine,ThirdAffiliatedHospital,Third基金项目：国家863基金（2007AA02Z416），国家自然科学基金（30400107）SupportedbytheNational

4、“863”FoundationofChina（2007AA02Z416），theNationalNaturalScienceFoundationofChina（30400107）作者简介：徐清华（1972-），女，河北省元氏县人，硕士，主管技师，主要从事基因诊断和生物传感器方面的研究，现工作于白求恩国际和平医院遗传医学科7通讯作者：陈鸣，电话：023-68757602，(E-mail)：chenming1971@yahoo.comMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400042;2Department

5、ofClinicalLaboratoryMedicine,FirstAffiliatedHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400038;3Department5,The26thResearchInstituteofChinaElectronicsTechnologyGroupCorporation,Chongqing400060,China)Abstract:ObjectiveToinvestinatetheeffectsofJapaneseencephalitisvir

6、us(JEV)targetconcentrationsonhybridizationefficiencywithleakysurfaceacousticwave(LSAW)genesensordetectionsystem.Methods0.5umol/LJEVprobewasfirstlyimmobilizedonthesurfaceofLSAWgenesensor,thendifferentconcentrationsJEVtargetsequencevariedfrom0.05to2.0umol/Lwashybridizedwi

7、ththeprobwhilepH7.610mmol/LPBSbuffer(includeNaionicconcentrations0.3mol/L)，andthenthechangesofphaseandequilibriumtimeofreactionwererecordedandanalyzed.ResultsPhasegraduallyincrasedfirstlyandthentrendedgentlywhentargetsequenceconcentrationsfrom0.05to2.0umol/L,and1.0umol/

8、Lwasthewatershed.Andnoevidentchangetendencywasobservedquilibriumtimeforhybridizationexcept0.05umol/L.Conclusio