新城疫病毒hbnulsrcf3与mukteswar、lasota株抗肿瘤效果的比较及其病毒hn基因的研究

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1、河：IL：IL方学院学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北北方学院所有。河：IL：IL方学院有权对本学位论文进行交流、公开和使用。导师签名／乏琚坳研究生签名：三◇f3年j月弓秒日河：IL：II：方学院研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。翩虢一鬈，鬻目录IIII

2、IIIIIIIIILIIIIIIIIIHHIIIIIIIlY2432870中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··3英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一5研究论文新城疫病毒}玎3NU／LSRC伍3与Mukteswar、LaSota株抗肿瘤效果的比较及其病毒HN基因的研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．7刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一’7实验仪器及材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·9实验方法与步骤⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·19附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·26附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·36讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·39结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．45参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··51致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．58个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．59中文摘要新城疫病毒HBNU／LSRC／F3与Mukteswar、LaSota株抗肿瘤效果的比较及其病毒HN基因的研究摘要新城疫病毒(NDV)为副粘病毒科副粘病毒属，为单股负链RNA病毒，于1927年首次分离并命名。NDV能感染多种人类肿瘤细胞，并能够特异性杀伤肿瘤细胞，但对人正常细胞无杀伤作用。食管癌是一种侵袭性很强的恶性消化道肿瘤，其对传统的放疗、化疗以及外科手术只是姑息性治疗，而无法彻底根治恶性肿瘤，并且副作用较大。本实验研究比较

5、3株NDV(NewcastleDiseaseVirus，NDV)(弱毒株HBNU／LSRC／F3株、中等毒力Mukteswar株、弱毒株LaSota株)对人食管癌ECAl09细胞的诱导凋亡作用。实验分HBNU／LSRC／F3株组、Mukteswar株组、LaSota株3株组和对照组。NDV经扩增后感染ECAl09细胞，CellCountingKit一8(CCK一8)法研究NDV对ECAl09细胞的抑制率，激光共聚焦显微镜观察经NDV感染双染后的ECAl09细胞的凋亡情况，流式细胞术检测其早期凋亡率，DNAladder法检测其凋

6、亡情况。设计特异性引物扩增出HBNU／LSRC／F3株的HN基因序列，并分析3株NDV的HN基因，比较核苷酸同源性。CCK一8提示3株NDV都能诱导肿瘤细胞凋亡。流式细胞仪检测HBNU／LSRC／F3株的早期凋亡率为(21．32+0．44)％，Mukteswar株和LaSota株的早期凋亡率为(22．27+0．23)％和(14．32+0．61)％，组间比较P

7、09细胞荧光强度和着色细胞数量明显多于LaSota株；DNAladder结果HBNU／LSRC／F3株和另外两株NDV处理过的ECAl09细胞DNA电泳均出现了梯状条带。比较3株NDV的同源性，核苷酸同源性在之间88％～91．8％，氨基酸同源性在90．2％--93．3％之间。中文摘要因HBNU／LSRC／F3株抑制率远高于LaSota株，仅比Mukteswar株略低，而中等毒力Mukteswar株致病力高应用有局限性，而HBNU／LSRC／F3株可能具有更强的抗肿瘤应用价值。关键词：NDV；ECAl09细胞；凋亡；食管癌；HN

8、基因英文摘要COMPARATIVEANALYSISOFANTI．TUMOREFFECTANDHNGENEoFNEWCASTLEDISEASEVIRUSHBNU／LSRC／F3，MUKTESWARANDLASOTASTRAINABSTRACTNewcastlediseasevi