康健关节葆对家兔膝骨性关节炎模型关节软骨细胞中mmp-1、timp-1表达的影响

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1、学院代号10716学号010021421121专业代码450227密级陕西中医学院ShanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文康健关节葆对家兔膝骨性关节炎模型关节软骨细胞中MMP-１、TIMP-1表达的影响学位申请人宋智全专业名称中西医结合临床申请学位类型临床医学硕士专业学位指导教师姓名李智斌论文提交日期2013年4月陕西中医学院学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已

2、经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名＿＿＿＿＿日期：年月日关于学位论文使用授权的声明陕西中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布

3、（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿日期：年月日论文导师签名＿＿＿＿＿日期：年月日摘要目的：采用免疫组化法测定兔KOA关节软骨细胞中MMP-1、TIMP-1表达的影响，探讨自拟新方康健关节葆对关节软骨修复和保护的可能机制，并阐明该药在改善关节功能和保护关节软骨等方面的作用，为临床治疗KOA提供实验及其理论依据。方法：1分组、造模：成年健康新西兰大白兔50只，雌、雄各半，按体重从轻到重进行编号，并随机分成5组。A：空白组，B：模型组，C：氨基葡萄糖组（西药对照组），D：壮

4、骨关节丸组（中药对照组）、E：康健关节葆组（实验组），每组10只。所有实验的新西兰大白兔在同等条件下饲养一周，无其它不适后，进行造模，除空白组外，余组用4%木瓜蛋白酶0.1ml右膝关节腔内注射，4周后建立兔右膝骨关节炎模型，是目前常用的造模方式。2给药方法：在常规喂养一周后，开始造模、给药，A组（空白组）：不造模，生理盐水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。B组（模型组）：只造模，生理盐水20ml，二次/日，10ml/次，灌服。C组（氨基葡萄糖组）：氨基葡萄糖液20ml（0.06g/ml）/日，二次/日，10ml/次

5、，灌服。D组（壮骨关节丸组）：壮骨关节丸水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。E组（康健关节葆组）：康健关节葆水溶液20ml（0.07g/ml）/日，二次/日，10ml/次，灌服。3取材及检测：在实验动物造模4周结束后，分别取各组兔膝关节软骨，行大体肉眼观察、HE染色观察及免疫组化法测定MMP-1、TIMP－1的含量变化，行统计学分析。结果：1.从实验动物的解剖后，肉眼大体观察显示，模型组兔膝关节软骨具有明显的退行性改变，符合造模的要求，康健关节葆能很好的缓解关节软骨破坏，且比其它对照组效

6、果显著。2.HE染色后光学显微镜观察及兔关节软骨细胞MMP-1、TIMP-1免疫组化显示：康健关节葆组的MMP-1表达较模型组明显降低，P<0.01有显著性差异。康健关节葆组的TIMP－1表达较模型组升高，P<0.05有统计学意义。由此可以说明康健关节葆能降低关节软骨MMP－1的表达水平，对TIMP-1的表达有升高作用，从而延缓或减慢软骨基质的降解、促进软骨修复。结论：康健关节葆能显著降低OA模型兔关节软骨中MMP-1含量，且对TIMP-1据有升高作用，以减慢及延缓兔膝关节炎中软骨的破坏或降解，能起到改善关节功能的作用。

7、这可能是该药修复受损软骨和保护未受损的软骨机制之一。为康健关节葆在临床治疗OA提供了理论依据。关键词：骨性关节炎；康健关节葆；基质金属蛋白酶-1；基质金属蛋白酶－1抑制剂KangjianguanjiebaojointofrabbitkneeosteoarthritismodelCartilagecellsintheexpressionofMMP1andTIMP-1AbstractObjective:theKOArabbitarticularcartilagecellswasevaluatedbyimmunohistoch

8、emicalmethodintheinfluenceoftheexpressionofMMP1andTIMP-1,toexploretheNewZealandfitjointremainsthepossiblemechanismofarticularcartilagerepairandprotection,andto