唾液腺腺样囊性癌cscs与emt相关性研究

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1、中图分类号＆2三窆：墨2UDC610硕士学位论文学校代码10533密级坌珏唾液腺腺样囊性癌CSCs与EMT相关性研究Researchonthecorrelationbetweencancerstemcellsandepithelial·-mesenchymaltransitioninTGF--Pl--inducedACC·-Mcells作者姓名：肖砺锋学科专业：口腔临床医学研究方向：口腔颌面外科学学院(系、所)：口腔医学院指导教师：蒋灿华教授一一逝巡一一，罐中南大学二零一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特

2、别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：肖盔蜂日期：龟凸年上月生目学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名

3、：肄导师签日期：丛年』月丝曰唾液腺腺样囊性癌CSCs与EMT相关性研究摘要目的结合上皮间充质转化(epithelial．mesenchymaltransition，EMT)学说及肿瘤干细胞(cancerstemcells，CSCs)学说，研究人唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系ACC．M细胞经TGF．p1诱导后的增殖情况及EMT与CSCs相关特殊标记物表达的相关性，并探讨其意义。方法(1)利用EdU(5一ethynyl．2’．deoxyuridine，5．乙炔基．2’脱氧尿嘧啶核苷)标记技术，荧光显微镜下观察TGF—p1诱导前后ACC—M细胞中含有EdU的细胞数；(2)10ng／mlTGF

4、．B1诱导培养ACC．M细胞，蛋白质印迹技术(Westernblot)检测培养Oh、12h、24h、48h、72h后ACC．M细胞EMT相关特殊标记物E．cad、N．cad、Vimentin、MMP．2以及CSCs相关特殊标记物Bmi．1、Oct．4、CD44、CD24表达的动态变化，并进行相关性分析。结果(1)诱导后含EdU的ACC．M细胞明显多于诱导前，且随培养时间延长数目逐渐增多，采用配对t检验对数据进行统计分析，P<0．05，差异具有统计学意义。(2)随TGF．p1诱导时间的延长，ACC．M细胞中E—cad、Oct一4、CD24表达逐渐降低；N—cad、Vimnentin、MM

5、P．2、Bmi．1、CD44表达逐渐增强。经统计学分析，EMT与CSCs相关特殊标记物的表达具有线性相关关系(P=O000<0．05)。结论(1)TGF．B1能够在体外促进人唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系ACC．M细胞的增殖；(2)TGF．$l诱导ACC．M细胞发生EMT的同时伴有CSCs相关特殊标记物表达的变化。关键词；腺样囊性癌；肿瘤千细胞；转化生长因子B，；上皮间充质．转化：5．乙炔基一2’脱氧尿嘧啶核苷分类号：R739．87IIResearchonthecorrelationbetweencancerstemcellsandepithelial—mesenchymaltrans

6、itioninTGF·B1一inducedAbstractACC．McellsObjectiveCombiningEMTandCSCstheories，thisstudypreliminarilyresearchedonthedifferenceofproliferationandtheexpressionofbiomarkersrelatedtoepithelial—mesenchymaltransitionandcancerstemcellincelllineACC—MinducedbyTGF—p1anddiscussesitssignificanc．Methods(1)ACC—M

7、cellscontainingEdUwereobservedunderfluorescencemicroscopebeforeandafterinducedbyTGF—Dlandpairedttestwasusedforstatisticalanalysis．(2)TheexpressionofEMTrelatedmarkersE．cad，N．cad，Vimentin，MMP一2andCSCsrelatedmarkersBmi．1，Oct．4，