唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系cscs亚群的筛选鉴定

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1、中图分类号UDCR739．876l0硕士学位论文学校代码!Q§塑密级公开唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系CSCs亚群的筛选鉴定SortingandidentifyingthegroupofcancerstemcellsincelllineACC—M作者姓名：黄鹏鑫学科专业：口腔临床医学研究方向：口腔颌面外科学学院(系、所)：口腔医学院指导教师：蒋灿华教授答辩委员会主席兰型中南大学二0一三年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特另tlDH以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他

2、人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：遗煎叁日期：幺竺!兰年』月坐日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。硕士

3、学位论文中文摘要摘要唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系CSCs亚群的筛选鉴定目的运用Q—PCR技术检测以ABCG2为标记物流式细胞仪分选前后ACC—M细胞中上皮间质转化(epithelial—mesenchymaltransition，EMT)与肿瘤干细胞(cancerstemcells，CSCs)相关标记物表达情况，初步筛选唾液腺腺样囊性癌肺高转移细胞系肿瘤干细胞亚群，并结合EMT与CSCs学说讨论其意义。方法(1)10ng／mlTGF—pl诱导培养ACC—M细胞72h，Q—PCR监测ACC—M细胞EMT相关标记物E—cadherin、N—cad

4、herin、Vimentin、MMP一2及CSCs相关标记物Bmi一1、Oct一4、CD44、CD24表达的动态变化。(2)流式细胞术检测TGF—p1对ACC—M细胞中ABCG2+细胞比例的调节变化。(3)以ABCG2为标记物，应用流式细胞术对TGF一131诱导前后ACC—M细胞进行分选，实验共分为6组，即A1：TGF一91诱导一、B1：TGF—p1诱导+、A2：TGF—pl诱导一ABCG2+、B2：TGF—p1诱导+ABCG2+、A3：TGF—B1诱导一ABCG2一、B3：TGF—B1诱导+ABCG2一，Q—PCR检测6组细胞EMT及CSCs

5、相关标记物的表达情况。结果(1)EMT相关标记物：上皮表型标记物E—cadherin随诱导时间延长表达逐渐减弱，问质表型标记物N—cadherin与Vimentin、EMT辅助因子MMP一2随诱导时间延长表达逐渐增强；CSCs相关标记物：转录因子Oct一4、粘附分子CD24随诱导时间延长表达逐渐减弱，原癌基因Bmi一1、粘附CD44随诱导时间延长表达逐渐增强；EMTII硕士学位论文中文摘要的发生与CSCs相关标记物表达密切相关。(2)经TGF—p1诱导后，ABCG2+细胞比例由3．06％增加至6．66％。(3)诱导前后未分选组、ABCG2+组及

6、ABCG2一组各指标表达情况：①诱导前后，上皮表型标记物E—cadherin均在ABCG2一组表达最高，未分选组表达稍低，ABCG2+组表达最低；②诱导前后，间质表型标记物N—cadherin、EMT辅助因子MMP一2、原癌基因Bmi一1及转录因子Oct一4均在ABCG2一组表达最低，未分选组表达稍高，ABCG2+组表达最高；③粘附分子CD44诱导前在各组表达无明显差异，而诱导后则表现为ABCG2+组最高，ABCG2一组与未分选组表达无明显差异；④诱导前后，间质表型标记物Vimentin与粘附分子CD24在三组的表达均无明显差异。未分选组、AB

7、CG2+组及ABCG2一组诱导前后均表现为：①TGF—J31诱导组较未诱导组低表达E—cadherin、Oct一4、CD24；②TGF—pl诱导组较未诱导组高表达N—cadherin、Vimentin、MMP一2、Bmi一1及CD44。结论(1)TGF—pl可诱导ACC—M细胞发生EMT；EMT发生同时，伴随有ACC—M细胞中SPCs亚群表型表达增强，且SPCs较非SPCs更易发生EMT改变。(2)Bmi一1、Oct一4、CD44与CD24参与ACC—M细胞中CSCs亚群比例的调节，且Bmi一1可能是ACC。M细胞中CSCs特殊标记物之一。图1

8、9幅，表70个，参考文献103篇关键词：腺样囊性癌；肿瘤干细胞；上皮间质转化；ABCG2；TGF—p1分类号：R739．87III硕士学位论文英文摘要