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时间:2019-03-04
《大鼠脊髓缺血后延迟性瘫痪模型的建立及发生机制初探》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中图分类号UDCR614610学校代码!Q三3三密级坌珏博士学位论文大鼠脊髓缺血后延迟性瘫痪模型的建立及发生机制初探Establishmentofaratmodelofdelayedspinalcordparaplegiaandstudyofitsunderlyingmechanisms作者姓名:学科专业:研究方向:院、系(所):指导教师:贺亮临床医学麻醉学湘雅二医院徐军美教授答辩委员会主席中南大学二。一三年五月原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其
2、他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名:学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名:翩签趁魄础年工月掣日摘要目的:1.模
3、仿胸主动脉瘤、胸腹主动脉瘤修复术对脊髓血供的影响,建立一个贴近临床实际工作、操作较为简单、可重复性较高、延迟性瘫痪发生率较高、实验动物死亡率较低、存活时间较长的大鼠脊髓缺血后延迟性瘫痪的动物模型,探讨导致延迟性瘫痪的主要危险因素。2.观察延迟性瘫痪大鼠脊髓的病理改变,探讨脊髓缺血后延迟性瘫痪可能的发生机制。3.依据本研究提出的脊髓缺血后延迟性瘫痪可能的发病机制,进行治疗,观察治疗效果,并对本研究关于脊髓缺血后延迟性瘫痪发病机制的假说加以验证。方法:1.选取SD大鼠为实验动物,模拟胸、胸腹主动脉瘤修复术,开胸后在左锁骨下动脉与降主动脉交汇处以无创血管夹阻断降主
4、动脉,造成腰段脊髓缺血。按照阻断降主动脉时体温和不同的阻断时间,将大鼠分组。观察各组大鼠延迟性瘫痪发生率、生存率、生存时间;观察降主动脉阻断时间、阻断时大鼠的体温对延迟性瘫痪的影响。2.选择在33.0+0.5摄氏度下阻断降主动脉40min的大鼠与假手术组大鼠为研究对象。观察解除降主动脉阻断后6小时、30小时、48小时,大鼠腰膨大段脊髓Nissl染色、免疫荧光双标、REAL-TIMEPCR检测结果。3.选择在33.0+0.5摄氏度下阻断降主动脉40min大鼠和假手术组大鼠为实验对象。接受降主动脉阻断的大鼠,按照是否使用小胶质细胞抑制剂米诺环素及米诺环素的不同剂
5、量,分为生理盐水组、米诺环素30mg/kg组、米诺环素90mg/kg组。观察各组大鼠术后各时间点BBB评分、大鼠的生存率与存活时间。研究结果:1.在接受降主动脉阻断的各组大鼠中,在33.0+0.5摄氏度下阻断降主动脉40min组大鼠,其延迟性瘫痪发生率较高(73%);死亡率不随延迟性瘫痪发生率升高而升高。在低温下、常温下均存在一个导致术后发生延迟性瘫痪的阻断降主动脉时间窗。常温下的时间窗为10.11.5rain,低温下的时间窗为18.40rain。2.大鼠在33.0+0.5摄氏度下接受降主动脉阻断40min后,观察腰膨大段脊髓病理改变。Nissl染色显示,在
6、解除阻断后6小时,与假手术组比较,腰膨大段脊髓前角运动神经元并无明显减少,其差异无统计学意义,P>0.05;而在解除阻断后30小时,出现运动神经元数目减少,与假手术组其差异有统计学意义,P<0.05;在解除阻断后48小时,运动神经元数目进一步减少,可见大片运动神经元坏死后的空泡,运动神经元数目少于假手术组与解除阻断后30小时组,其差异有统计学意义,P<0.05。免疫荧光双标显示,Ibal、IL.113、IL一6,在解除阻断后6小时,与假手术组比较,其灰度值差异无统计学意义,P>0.05;而在解除阻断后30小时,与假手术组比较,其灰度值均升高,差异有统计学意义
7、,P<0.05;IL.113与Ibal、IL.6与Ibal共表达。REAL.TIMEPCR检测显示,在解除阻断后30小时,IL.1B与IL。6mRNA的表达均高于假手术组,其差异有统计学意义,P<0.05。3.在解除降主动脉阻断后1小时,予以米诺环素90mg/kg组大鼠,其术后30、36、48、60、72小时下肢运动功能的BBB评分高于11T予以生理盐水组大鼠,其差异有统计学意义,P<0.05;而予以米诺环素30mg/kg组大鼠,在术后30、36、48、60、72小时BBB评分与生理盐水组差异无统计学意义,P>0.05。各组大鼠术后生存率差异无统计学意义,P
8、>0.05。实验结论:1.在33.0-4-0.5摄氏
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