卵母细胞分泌因子在人mⅱ卵母细胞的卵丘颗粒细胞中的表达及其和卵母细胞发育潜能关系的-研究

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1、万方数据中文摘要QuantiFast⑧SYBR@GreenPCRkit荧光定量PCR反应试剂盒说明书进行：具体条件设置如下：95℃预变性2min；95℃变性15s，60℃退火／延伸30s，共40个循环。运算分析最终所得Ct值。6数据统计分析将realtimeRT-PCR所得的Ct值按照公式2△C‘进行运算，数据以均数士标准差(i士s)表示，利用SPSSl3．0软件进行统计学处理，比较组间细胞因子水平的差异采用独立样本t检验，P

2、与卵丘颗粒细胞是一一对应的，所以根据每个卵子受精、卵裂及囊胚发育情况，回顾性将CCs进行分组。根据卵子受精情况将CCs分为正常受精组(长方案组CCs=127份，微刺激方案组CCs--136份)及异常受精组(长方案组CCs=45份，微刺激方案组CCs=24份)；正常受精组根据第3日胚胎卵裂情况分为优质卵裂胚形成组(长方案组CCs=58份，微刺激方案组CCs=76份)及非优质卵裂胚形成组(长方案组CCs=69份，微刺激方案组CCs=60份)；非优质卵裂胚继续培养，根据第5日形成囊胚情况，分为优质囊胚形成组(长方案组CCs=24份，微刺激方案组CCs=12份)及非优质囊胚

3、形成组(长方案组CCs=45份，微刺激方案组CCs=48份)。未成熟、畸形卵子所对应的卵丘颗粒不列入分组研究中。共有41例患者332份(常规长方案患者21例172份，微刺激方案20例i60份)卵丘颗粒细胞用于RT-PCR检测。2人卵丘颗粒细胞中GDF．9与卵母细胞发育潜能的关系GDF．9有利于卵母细胞受精、卵裂及囊胚的形成。通过本实验可以看出，2种促排卵方案中，GDF．9mRNA相对表达量：正常受精组显著高于异常受精组(尸=O．020，P=-0．001)；优质卵裂胚形成组显著高于非优质卵裂胚形成组(P=O．001，P=-0．043)；优质囊胚形成组与非优质囊胚形成组

4、间有统计学差异(尸=O．002，P=0．001)。3人卵丘颗粒细胞中BMP．15与卵母细胞发育潜能的关系通过本实验可以看出，不论常规长方案组还是微刺激方案组，BMP．15mRNA的相对表达量在卵母细胞发育的不同结局中均有显著性差异。2种促排方案中，BMP．15mRNA相对表达量：正常受精组显著高于异常受精万方数据中文摘要组(P=-0．000，P=0．000)；优质卵裂胚形成组与非优质卵裂胚形成组，组间有显著性差异(仁O．003，P=0．048)；优质囊胚形成组与非优质囊胚形成组间有明显统计学差异(尸=O．033，P=-0．029)。可以看出，BMP．15mRNA相对

5、含量与卵母细胞发育潜能成正相关。4人卵丘颗粒细胞中TGF．131与卵母细胞发育潜能的关系TGFl31含量与卵子的质量和发育潜能密切相关。TGF．131基因mRNA无论在常规长方案组还是微刺激方案组中，其相对表达量在正常受精组中显著高于异常受精组(尸=O．003，P=0．022)；优质卵裂胚形成组显著高于非优质卵裂胚形成组(P=-0．015，P=0．022)；优质囊胚形成组与非优质囊胚形成组间有明显统计学差异(P=-0．001，P=0．025)。5人卵丘颗粒细胞中Smad3与卵母细胞发育潜能的关系常规长方案组及微刺激方案组中，Smad3mRNA的相对表达量正常受精组显

6、著高于异常受精组(尸=O．006，P=-0．012)：优质卵裂胚形成组与非优质卵裂胚形成组，组间比较有显著性差异(尸-O．019，P=0．041)；优质囊胚形成组与非优质囊胚形成组间有明显统计学差异(卢O．000，P=0．028)。可以看出，卵丘颗粒细胞中Smad3mRNA的含量较高的卵母细胞有较好的发育潜能。6不同促排方案与GDF．9、BMP．15、TGF．131和Smad3表达量的关系常规长方案与微刺激方案中，年龄无统计学差异。GDF．9和Smad3相对表达量在常规长方案组中显著高于微刺激方案组(卢O．000，P=0．004，P=0．005)，BMP．15相对表

7、达量在微刺激组中显著高于常规长方案组(尸=O．004)，而TGF．131相对表达量在常规长方案组中和微刺激方案组中无统计学差异(尸=O．653)。提示GDF．9、BMP．15和Smad3因子在CCs中的表达量与促排卵方案有关，常规长方案组可以刺激CCs分泌更多的GDF．9和Smad3因子，微刺激方案组可以刺激CCs分泌更多的BMP．15因子，TGF．131相对含量与促排卵方案无关。结论：1GDF．9、BMP．15、TGF．131、Smad3在卵丘颗粒细胞中的相对表达量与卵母细胞质量及发育潜能成正相关，提示其可以作为评价卵母细胞质量、预测卵母细胞的发育潜能的客观指