β-双酮类抗生素复合污染对斑马鱼的毒理学研究

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1、答辩委员会主席：答辩委员会成员：论文答辩日期：2Q!三生5旦2垒旦目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4引。言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．6第一章p一双酮类抗生素复合污染对斑马鱼胚胎毒性效应研究1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．81．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．122．1DKAs的致毒性：LCso和ECso⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．2DKAs致胚胎畸型⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．142．3DKAs致胚胎发育毒性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．142．4DKAs对行为学的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．162．5DKAs对GSH含量和SOD活性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．173分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．184一J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．19第二章p．双酮类抗生素暴露的斑马鱼转录组研究1材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．201．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯212结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．1TotalRNA的质量评估⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．242．2测序数据统计和质量评估⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．3基因表达注释⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．24

4、2．4差异基因筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．252．5差异基因功能分析．GO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一252．6差异基因功能分析．COG⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯272．7差异基因功能分析．KEGG⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．284，J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．30总结与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、37致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38综述及参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．48温州医学院硕士学位论文缩略词表缩略词英文全称中文全称DKASEMGSHSODhpfdpfPBSOECD13-Diketoneantibioticsp．双酮类抗生素Emb巧omedium胚胎培养液Reducedglutathione还原型谷胱甘肽Superoxidedismutase超氧化物歧化酶hourspostfertilization受精后小时数days

6、postfertilization受精后天数Phosphatebuffersolution磷酸缓冲液Orgalliza‘i。nforEc。n。mic经济合作与开发组织CooperationandDevelopment温州医学院硕士学位论文p．双酮类抗生素复合污染对斑马鱼的毒理学研究中文摘要B．双酮类抗生素(DKAs)是一种假持久性新型污染物，广泛应用于人类和动物疾病的预防和治疗，尤其是作为生长促进剂被大量用于禽畜养殖。人畜服用此类药物大多不能被吸收，多以原药或活性代谢物形式进入环境，并对环境和人类健康构成了严重威胁。目前，对DKAs的单剂毒性和其复合毒性的研究尚不全面、深入，特别

7、是利用组学技术对DKAs毒性机制的研究在国内外鲜有报道。本文以模式生物斑马鱼作为研究对象，开展了六种DKA复合后对斑马鱼胚胎的发育毒性、行为毒性和运动神经毒性研究。研究表明，AB品系斑马鱼胚胎自6hpf至120hpf暴毒于不同浓度的DKAs实验液，其在120hpf时的半数致死浓度(LCso)和半数致畸浓度(ECso)分别为211mg／L和113mg／L，说明DKAs和其他持久性污染物相比是一种低毒性的污染物。DKAs导致斑马鱼的主要畸型是孵化延迟、游囊关闭和脊柱弯曲，还发现其能减