β-双酮类抗生素胁迫对斑马鱼毒性的组学差异表达研究

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1、万方数据论文题目：邑：巫酩耋埴生苤监迫型基呈鱼壹性鲍组堂差显麦达盟究答辩委员会主席：答辩委员会成员：论文答辩日期：兰!!堕!尘!旦万方数据目录IIIIIIIIIIlUUIllIY2914218中英文缩略语对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6第一章基于蛋白质组学探讨

2、DKAs对斑马鱼的毒性效应⋯⋯⋯⋯．．81．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．1．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一81．1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯111．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．171．2．1蛋白质组及功能分类⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯171．2．2qRT—PCR分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯231．2．3DKAs影响斑马鱼仔鱼的行为⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．241．2．4DKAs对心脏发育和心率的影响⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．251．2．5DKAs对CK活力和Cr浓度的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯261．2．6DKAs对心脏组织的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．261．3分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．281．4一J、结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30第二章基于转录组学研究DKAs对斑马鱼的遗传毒性⋯⋯⋯⋯⋯312．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．312．1．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯312．1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32万方数据2．2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．362．2．1RNA质量及测序数据质量评估⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯362．2．2基因表达注释⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯372．2．3差异基因筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯382．2．4差异基因GO分析和KEGG分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯382．2．5对形态发育的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯412．2．6对性激素(E2、T)的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一412．2．7对性成熟指数的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4

5、22．2．8组织病理学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯432．2．9活性氧(ROS)的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯442．3分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．452．4小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．49附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一54致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．55综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯．．561．概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．562．抗生素在环境中的污染现状⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．563．抗生素的生态风险性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．584．展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．59参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一60独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．63万方数据温州医科大学硕士学位论文万方数据温州医科大学硕士学位论文p．双酮类抗生素胁迫对斑马鱼毒性的组学差异表达研

7、究摘要p．双酮类抗生素(DKAs)是一种新型环境污染物，被大剂量广泛的应用于人类和动物疾病治疗、畜牧业和水产养殖业中，使其产生“假持久”现象，在水生态系统中存在慢性毒性作用。国内外的研究多集中于单剂抗生素的毒理作用，而抗生素复合污染的毒性作用较为复杂，目前还鲜有报道。在本研究中，以模式生物斑马鱼(Daniorerio)为实验材料，选取六种广泛使用的D．双酮类抗生素：环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、盐酸强力霉素、盐酸金霉素、土霉素作为实验药物，对斑马鱼进行长期慢性复合污染。利用蛋白质组学和转录组学技术探讨其在分子水平

8、上对斑马鱼的毒性效应，同时结合一些毒理指标进行验证。研究表明，与对照组相比，共26个蛋白质有2倍以上的差异表达，其中14个蛋白上调，12个蛋白下调。这些差异表达的蛋白主要涉及的功能是信号转导机制和细胞骨架。qRT．PCR分析26个目标基因中，I1个基因在翻译水平和转录水平上表达一致。低剂量DKAs(4．69和9．38mg／L)刺激斑马鱼的自主运动，而斑马鱼肌酸激酶活力和肌