丁香酚对斑马鱼麻醉效果的研究.pdf

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1、水产科技情报2013，40(4)193doi：10．3969／j．issn．1001—1994．2013．04．006丁香酚对斑马鱼麻醉效果的研究陈德芳汪开毓廖国平杜超(1四川农业大学动物科技学院水产养殖系，雅安625014；2四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点试验室，雅安625014)摘要：采用丁香酚对斑马鱼(0．36±0．03g)进行了麻醉效果和急性毒性研究。麻醉试验的结果显示：水温28±1℃下，丁香酚对斑马鱼的理想麻醉浓度为20mg·L～，麻醉时问为2．25±0．028rain，复苏时间为0．94±0．048rain

2、；麻醉时间11rain内，复苏率均为100％。急性毒性试验的结果显示：水温28±1℃下，丁香酚对斑马鱼96h的C50为5．97mg·L’。，95％可信范围为5．36～6．66mg·L～，安全浓度(sc)为0．60mg·L‘。。试验结果表明，作为一种鱼用麻醉剂，丁香酚在一定的范围内有效，生产试验使用中应进一步关注其有效性、安全性和潜在影响。关键词：丁香酚；斑马鱼；麻醉效果；毒性效果鱼类麻醉剂能使鱼鳃盖张合频率下降，体内华鲟幼鱼等多种淡水、海水鱼类麻醉行为、麻新陈代谢速度降低，对外界刺激的反应减缓，对氧醉生理和麻醉效果的研究。由此可

3、见，丁香酚作气的需求和能量消耗减少，使整个鱼体处于麻醉为鱼用麻醉剂具有广阔的应用前景。镇静状态，从而方便进行活鱼试验操作和长途运斑马鱼(Daniorerio)又名蓝条鱼、花条鱼等，输。目前鱼类麻醉剂包括MS一222、苯唑卡因、隶属于鲤形目(Cypriniformes)，鲤科(Cyprini—CO、丁香酚、喹哪丁、三氯乙醛、2一苯氧乙醇等dae)，鱼丹属(Danio)，是原产于印度、孟加拉国的近30种-3]。MS一222是美国国家食品及药品一种热带淡水观赏鱼，成鱼体长3～5CIll。由于管理局(FoodandDrugAdminis

4、tration，FDA)批准斑马鱼的基因与人类87％相似，因而被作为一种使用的鱼用麻醉剂，但价格较贵，在国内推广应用理想的模式生物广泛应用于发育学、遗传学和分具有明显的局限性。丁香酚(Eugeno1)是一种毒子生物学等研究领域，同时被作为一种有性较小的天然植物香料，在医学上被广泛用作牙效、全面的环境监测生物被广泛应用于环境生态科的镇痛剂；丁香酚及其代谢物被认为能够快速学研究l1HJ。斑马鱼作为模式实验动物被如此地从血液和组织中排出，不会诱发机体产生突变广泛地应用到生命科学试验研究，因此，采用适当物质；FDA认为，丁香酚是对人类无

5、毒害的物质，的麻醉剂和科学的麻醉方法，确保它在无行为异作为一种新型的鱼用麻醉剂，可不用担心其对人常、无心理紧张压抑和痛苦等的状态下康乐生活，类和环境造成危害；丁香酚价格成本低廉，市场推是实现实验动物福利的重要保障。丁香酚作为一广可行性强。目前，国内外已开展了丁香酚对金种新型的鱼用麻醉剂，目前尚缺少关于它对斑马鱼、鲤鱼、鲫鱼、虹鳟、中国对虾和中鱼麻醉作用效果的研究。本试验通过观察不同浓收稿日期：2013—03—26作者简介：陈德芳(1982一)，女，讲师，主要从事水生动物疾病生态防控研究。通讯作者：汪开毓(1955一)，男，教授，

6、主要从事水生动物病理与药理研究。基金项目：教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRT0848)。l94水产科技情报2013，40(4)度和浸泡时问下丁香酚对斑马鱼行为的影响，对1．3．1不同浓度对斑马鱼的麻醉效果影响麻醉时间和复苏时间进行测定，明确活鱼操作中采用静水试验法。随机选取斑马鱼90尾，分丁香酚对斑马鱼的最佳麻醉剂量，并通过96h急成18组，每组5尾。在28℃水温下，将鱼分别放性毒性研究，明确丁香酚对斑马鱼的安全浓度。入浓度为10、15、20、30、40、50mg·L的丁香酚本试验从麻醉效果和急性毒性两个方

7、面探讨丁香溶液中，每个浓度设2个重复。观察试验鱼的行酚对斑马鱼的作用效果，旨在为开展丁香酚对斑为特征，测定并记录其麻醉时间和复苏时间，确定马鱼的麻醉生理研究奠定基础，为斑马鱼活鱼试理想麻醉浓度。验操作中丁香酚麻醉提供数据参考。1．3．2不同麻醉时间对斑马鱼复苏的影响采用静水试验法。在28℃水温下，将90尾1材料和方法斑马鱼分成18组，在丁香酚理想麻醉浓度中分别浸泡5、7、9、11、15、20min后放回清水中，每个时1．1试验药品间点各5尾试验鱼，每个点设两个重复。记录复丁香酚购自阿拉丁化学试剂有限公司，纯度苏时间及复苏率，确定

8、麻醉时间。>199％，密度约为1．06mg·L(25℃)。1．4急性毒性试验1．2试验用鱼及其饲养1．4．1试验方法试验用斑马鱼购于成都市某市场，体长3．15采用半静水式试验法，试验期间每24h更换±0．52cm，体质量0．36±0．03g，体质健壮，无外试验液