toll样受体2和4在大鼠心肌缺血再灌注损伤模型中的运态表达

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。--：一一圳邪一彳终黪黪簸日譬’l?·．。jlYJ’。·‘一一一、1·‘≮∥。’，．≮≤≥j。≥F∥研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除

2、了文中特别加以标注等内容外，文中不包含其他人已发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：空11身蔼导师签章：方年月日目录lIIIIIIIIIIIIIlY2336582中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’8研究论文Toll样受体2和4在大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型中的动态表达前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯1U“月U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·25附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·36讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一40结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯。43综述Toll样受体与心肌心肌缺血／再灌注损伤的关系⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·56个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一57中文摘要TolI样受体2和4在大鼠心肌缺血／再灌注损伤模型中的动态表达摘要目的：心肌缺血／再灌注损伤(myocardialischemic／reperfusioninjury，MI／RI)是指心肌组织缺血一段时间，当血流重新恢复后，组织的损伤程度不仅没有减轻反而较缺血时进一步加重、器官功能进一步恶化的综合征。局部和全身的炎症反应为心肌

5、缺血／再灌注损伤的特征，进一步可能发展为组织损伤并严重影响左心室功能。越来越多的实验研究证明心肌缺血／再灌注是一组慢性炎症疾病。近年来发现Toll样受体在炎症反应中的作用越来越重要，与缺血／再灌注损伤的关系越来越紧密。本实验旨在通过观察大鼠心肌组织缺血／再灌注急性期Toll样受体2(Toll．1ikereceptor2，TLR2)和4(Toll．1ikereceptor4，TLR4)及相关炎性因子mRNA及蛋白质的表达，探讨TLR2和TU洱的相互关系及各自在心肌缺血／再灌注损伤中的作用。方法：选择体重相似的雄·

6、生Wistar大鼠42只，

7、根据再灌注时间不同分为7组(再灌注l、2、4、6、12、24h和7d组)，每组6只。用戊巴比妥钠麻醉大鼠后固定于鼠台，在呼吸机辅助呼吸的前提下，开胸挤出心脏，结扎前降支主干，建立大鼠心肌缺血模型，缺血lh后，再次开胸，在胸腔内用显微外科剪剪开结扎线，建立再灌注模型，再灌注达到预期时间后，再次麻醉大鼠，固定于鼠台上，分离颈部皮肤及皮下组织，露出气管并进行气管插管，然后分离出右侧颈总动脉并插管备用。开胸分离出心脏，原位结扎前降支。从颈总动脉注入约1～1．5mL酞菁蓝溶液，可见到心脏部分变蓝，立即剪下心脏，用冰盐水冲洗干净后放于干净培养皿内，置

8、于冰箱内约8min后取出，将心脏切为约2mm的切片，随后进行2，3，5．氯化三苯基四氮唑(2，3，5．Triphenyltetrazoliumchloride，TTC)染色，染色结束后用扫描仪扫描图像并保存，用图像分析软件分析缺血面积及梗死面积，并根据结果计算缺血范围及梗死范围。再选择同样体重范围的雄性Wistar大鼠84只，随机分为缺血／再灌注组(I／R组)和假手术组(sham组)，每组42只，I／R组及sham组再按不同再灌注时间点(1、2、4、6、12、24h和7d)随机分为7组，每组6只。再灌注模型中文摘要建立后，在达到预定时间点

9、后开胸分离出心脏，从主动脉弓水平剪下一心脏，用冰生理盐水冲洗干净后置于干净培养皿中，于冰箱预冷约8min，取出后弃去心尖部及心底部，将心脏切成厚度约2ram的心肌切片，其中一片放入包埋框进行石