toll样受体4的表达及mir-tlr4干扰对hbv相关肝癌细胞的生物学活性影响

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：幸酗签字日期：H”年口纱月夕日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以

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3、lot检测Hep3B、HepG2．2．15、HepG2、SMMC7721及Huh7五种肝癌细胞中TLR4蛋白表达情况，选择TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞作为研究对象。2、构建4个miR．TLR4质粒和一个阴性对照质粒，选择干扰效果明显的质粒转染TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞。实验分为正常对照组，阴性对照组，干扰质粒3组及干扰质粒4组。通过MTT比色法、克隆平板形成实验、流式细胞术分别检测干扰TLR4表达对肝癌细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响。结果：1、TLR4基因在五种肝癌细胞株中均有表达，在Hep3B细胞中表达最高，其次是SMMC7721、

4、HepG2．2．15和HepG2细胞，而在Huh7细胞中表达最低。2、与正常组和阴性对照组相比，干扰TLR4表达后，Hep3B细胞的增殖能力明显受到抑制(P

5、；miR．TLR4质粒IIAbstmctABSTRACTPurpose：Toinvestigatetheeffectsoftoll—likereceptor4ongeneexpressionandcellgrowthinhumanHBV-relatedhepatocellularcarcinomacells．Methods：Toll-likereceptor4proteinexpressionwasanalyzedinfivehepatomacelllines(Hep3B，HepG2．2．15，HepG2，SMMC7721andHuh7)usingwes

6、temblowing．ThecellwithTLR4overexpressionwasselectedtobefurtherresearched．Fourgroups(normalgroup，negtivecontrolgroup，plasmidno．3groupandplasmidno．4group)weredivided．AfterinterferingtheTLR4expressioninoverexpressionhepatomacellviamiR·TLR4plasimids．cellproliferationwasmeasuredbycolo

7、rimetricmethylthiazolyltetrazolium(MTT)assay；cellclonogenicitywasdetectedbycloneformationassay；andcellapoptosisandcycledistributionwereexaminedbyflowcytometry．Results：TLIHwasexperssedinallthecelllines，anditwashigherinHep3BfollowedbySMMC7721、HepG2．2．15、HepG2andHuh7．Comparedwiththe

8、controlgroups，interferingtheexpressionof