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时间:2019-03-04
《toll样受体4的表达及mir-tlr4干扰对hbv相关肝癌细胞的生物学活性影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写):幸酗签字日期:H”年口纱月夕日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以
2、将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表,并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写):秀当驯锄签名(手写)4戥签字日期:,·/绰。矽月-_7日签字日期:纠p年∥‘月夕日摘要摘要目的:观察Toll样受体4在乙肝病毒相关肝癌细胞系中的表达及对其生物学活性的影响。方法:1、Westernb
3、lot检测Hep3B、HepG2.2.15、HepG2、SMMC7721及Huh7五种肝癌细胞中TLR4蛋白表达情况,选择TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞作为研究对象。2、构建4个miR.TLR4质粒和一个阴性对照质粒,选择干扰效果明显的质粒转染TLR4表达高的HBV阳性肝癌细胞。实验分为正常对照组,阴性对照组,干扰质粒3组及干扰质粒4组。通过MTT比色法、克隆平板形成实验、流式细胞术分别检测干扰TLR4表达对肝癌细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响。结果:1、TLR4基因在五种肝癌细胞株中均有表达,在Hep3B细胞中表达最高,其次是SMMC7721、
4、HepG2.2.15和HepG2细胞,而在Huh7细胞中表达最低。2、与正常组和阴性对照组相比,干扰TLR4表达后,Hep3B细胞的增殖能力明显受到抑制(P5、;miR.TLR4质粒IIAbstmctABSTRACTPurpose:Toinvestigatetheeffectsoftoll—likereceptor4ongeneexpressionandcellgrowthinhumanHBV-relatedhepatocellularcarcinomacells.Methods:Toll-likereceptor4proteinexpressionwasanalyzedinfivehepatomacelllines(Hep3B,HepG2.2.15,HepG2,SMMC7721andHuh7)usingwes6、temblowing.ThecellwithTLR4overexpressionwasselectedtobefurtherresearched.Fourgroups(normalgroup,negtivecontrolgroup,plasmidno.3groupandplasmidno.4group)weredivided.AfterinterferingtheTLR4expressioninoverexpressionhepatomacellviamiR·TLR4plasimids.cellproliferationwasmeasuredbycolo7、rimetricmethylthiazolyltetrazolium(MTT)assay;cellclonogenicitywasdetectedbycloneformationassay;andcellapoptosisandcycledistributionwereexaminedbyflowcytometry.Results:TLIHwasexperssedinallthecelllines,anditwashigherinHep3BfollowedbySMMC7721、HepG2.2.15、HepG2andHuh7.Comparedwiththe8、controlgroups,interferingtheexpressionof
5、;miR.TLR4质粒IIAbstmctABSTRACTPurpose:Toinvestigatetheeffectsoftoll—likereceptor4ongeneexpressionandcellgrowthinhumanHBV-relatedhepatocellularcarcinomacells.Methods:Toll-likereceptor4proteinexpressionwasanalyzedinfivehepatomacelllines(Hep3B,HepG2.2.15,HepG2,SMMC7721andHuh7)usingwes
6、temblowing.ThecellwithTLR4overexpressionwasselectedtobefurtherresearched.Fourgroups(normalgroup,negtivecontrolgroup,plasmidno.3groupandplasmidno.4group)weredivided.AfterinterferingtheTLR4expressioninoverexpressionhepatomacellviamiR·TLR4plasimids.cellproliferationwasmeasuredbycolo
7、rimetricmethylthiazolyltetrazolium(MTT)assay;cellclonogenicitywasdetectedbycloneformationassay;andcellapoptosisandcycledistributionwereexaminedbyflowcytometry.Results:TLIHwasexperssedinallthecelllines,anditwashigherinHep3BfollowedbySMMC7721、HepG2.2.15、HepG2andHuh7.Comparedwiththe
8、controlgroups,interferingtheexpressionof
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